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① 组织块培养法

组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法

。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞
，如白血病细胞、淋巴细胞
、骨髓细胞
、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离
，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养
，器官培养可保持器官组织的相对完整性
，可用于重点观察细胞间的联系
、排列情况和相互影响
，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称
：小鼠脐静脉内皮细胞

英文名称：Mouse Umbilical Vein Endothelial Cells

组织来源

：脐带组织

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

小鼠脐静脉内皮分离自脐带组织

；它是脐静脉的重要结构组成细胞之一，在机体的正常生理过程中发挥着重要作用。脐带是哺乳类的连接胎儿和胎盘的管状结构
，脐带中通过尿膜的血管即脐动脉和脐静脉，卵黄囊的血管即脐肠系膜动脉及脐肠系膜静脉。在子宫中，子宫动脉在胎盘的母体部分出的毛细血管
，与胎盘的子体部胎儿毛细血管靠近，在此处母体和胎儿的血液间进行CO2和O2，代谢产物即代谢废物和营养物质的交换。脐动脉将胎儿产生的废物运送至胎盘，脐静脉将O2和营养物质从胎盘运送给胎儿。

公司实验室分离的小鼠脐静脉内皮采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法

、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶
。

质量检测

公司实验室分离的小鼠脐静脉内皮经CD31免疫荧光鉴定
，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV
、支原体、细菌、酵母和真菌等。

包被条件 PLL（0.1mg/ml）
，明胶（0.1%）

培养基 含FBS
、生长添加剂
、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 内皮细胞样

传代特性 可传1-2代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气
，95%
；CO2
，5%

取材→分离→培养和维持

1、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型、分化程度

、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖
，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来
。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液、羊水
、胸水或腹水的悬液材料

，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟
。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞

。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散
，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。

① 机械分散法

特点:简便、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动

，使团块膨松，由块状变成絮状
，此时再采用机械法
，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散
，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液
，接种培养后，细胞容易贴壁生长。

蔗糖测定试剂盒（紫外比色法）

γ-谷酰半胱酸合成酶（γ-GCS）测定试剂盒（速率法）

超微量ATP酶测试盒（Na+K+、Ca2+Mg2+、T－ATP酶）

总巯基（-SH）测定试剂盒

植物钙调素(CAM)ELISA 试剂盒

Human ai nuclear factor aibody (ANF) ELISA Kit 人抗核因子抗体(ANF)试剂盒

Porcineadiponectin,ADPELISAKit 猪脂联素(ADP)试剂盒 进口分装

CLIAKitforADV-IgM(HumanAdenovirusIgM)ELISAKit人腺病毒IgM

血液氧化应激活性氧(ROS)鲁米诺化学发光法定量试剂盒50次

MouseStemcellfactor/mastcellgrowthfactor,SCF/MGFELISAKit小鼠干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)试剂盒

ICOSLG重组小鼠 ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG 蛋白 (His & Fc 标签) Protein

chloramphenicol/OVA 氯偶联鸡卵白蛋白蛋白 2mgchloramphenicol/OVA 氯偶联鸡卵白蛋白蛋白

GAPDH重组人 GAPDH 蛋白 (His 标签) Protein

ACOX1 Protein Human 重组人 ACOX1 / aox 蛋白 (His 标签)

LDLR Protein Mouse 重组小鼠 LDLR / LDL Receptor 蛋白 (His 标签)

chloramphenicol/OVA 氯偶联鸡卵白蛋白蛋白 2mgchloramphenicol/OVA 氯偶联鸡卵白蛋白蛋白

ACOX1 Protein Human 重组人 ACOX1 / aox 蛋白 (His 标签)

ICOSLG重组小鼠 ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG 蛋白 (His & Fc 标签) Protein

LDLR Protein Mouse 重组小鼠 LDLR / LDL Receptor 蛋白 (His 标签)

GAPDH重组人 GAPDH 蛋白 (His 标签) Protein

小鼠脐静脉内皮细胞大鼠钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱα(CAMK2α)试剂盒 ，英文名： CAMK2α ELISA Kit

Rat beta amyloid (A beta 1-40 1-40) ELISA Kit 大鼠β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)试剂盒

RatTumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKIT 大鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)试剂盒 进口分装

CLIAKitforDSIP(Humandeltasleep-inducingpeptide)ELISAKit人促睡眠肽

细胞培养液抗坏血酸比色法定量试剂盒20次

RatHistoneDeacetylase,HDELISAKit大鼠组织蛋白去乙酰化酶(HD)试剂盒

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行
。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月
。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。

本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用
，非食用