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① 组织块培养法

组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长

。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞
，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性

，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称：小鼠肺小动脉内皮细胞

英文名称：Mouse Pulmonary Arteriolar Endothelial Cells

组织来源
：肺小动脉

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

小鼠肺小动脉内皮分离自肺小动脉组织；肺动脉干是短而粗的动脉
，自右心室的动脉圆锥起始
，向左后上方斜升，先在升主动脉根部的前面，继而至其左侧，至主动脉弓的下方，约在第5胸椎高度，分为左、右肺动脉
。左肺动脉较短
，横行向左
，经左主支气管前方至左肺门

，分两支进入左肺的上、下叶。右肺动脉较长，横行向右
，经主动脉升部和上腔静脉的后方达右肺门，分3支进入右肺上
、中、下叶。左、右肺动脉的各分支在肺实质内又反复分支

，与支气管的分支伴行
，后达肺泡壁
，形成稠密的毛细血管网
。肺动脉输送的是含二氧化碳较多的静脉血
。在肺动脉干分叉处稍左侧与主动脉弓下缘之间有一结缔组织索，称动脉韧带。管径在0.3～1mm之间，为小动脉（small-artery），小动脉包括粗细不等的几级分支，也属肌性动脉。较大的小动脉，内膜有明显的内弹性膜
，中膜有几层平滑肌，外膜厚度与中膜相近，一般没有外弹性膜。口径在1mm以下的动脉，管壁有完整的平滑肌层及少量的弹性纤维和胶质纤维。小动脉是决定周围循环阻力大小的主要因素
，也是调节微循环灌注量的“总开关"。典型的小动脉
，其管壁的厚度与管径相比约为1∶2。中膜的肌层相对比其他动脉为厚
，当平滑肌在神经支配下强力收缩时，其管腔可以闭塞
，而使血液不能流入它所分布的毛细血管内，从而增加了周围血液循环的阻力。如果有许多小动脉同时收缩
，可使血压显著上升。反之，当小动脉的平滑肌舒张时，则可使大量的血液流入毛细血管，外周阻力明显下降，血压降低。终末小动脉(terminal arteri-ole)的口径为20～30μm；后小动脉(metar-teriole)
，又称毛细血管前小动脉(precapil-lary arteriole)的口径为12～15μm

。管壁内均有较稀疏的平滑肌，在毛细血管前小动脉分支的起始部分，管壁平滑肌成分增厚，叫做毛细血管前括约肌(precapillary sphinc-ter)，其收缩或舒张

，可调节真毛细血管的血流量，是调节微循环灌注量的“分开关"。支配小动脉平滑肌的交感神经纤维，可延伸到终末小动脉和后小动脉的平滑肌细胞
。在毛细血管前括约肌上交感神经纤维特别丰富。肺小动脉内皮细胞呈单层多角形铺路石状分布，该细胞在维持血管内外的动态平衡、合成和分泌细胞因子和介质、维持凝血和纤溶的动态平衡中起重要作用。

实验室分离的小鼠肺小动脉内皮采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测

实验室分离的小鼠肺小动脉内皮经CD31免疫荧光鉴定
，纯度可达90%以上
，且不含有HIV-1
、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等
。

包被条件
：PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）

培养基
：基础培养基，含FBS
、EGF
、bFGF、IGF、VEGF、Heparin、Hydrocortisone
、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：内皮细胞样

传代特性
：可传1-3代

消化液
：0.25%

培养条件：气相：空气，95%；CO2

，5%

小鼠肺小动脉内皮体外培养周期有限

；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。

取材→分离→培养和维持

1
、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型

、分化程度、年龄等

⑥ 作好记录

2
、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来
。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液
、羊水
、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟
。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层
，这样可根据需要收获目的细胞

。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料
，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。

① 机械分散法

特点:简便

、快速,但对组织机械损伤大
，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状
，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡
，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液
，接种培养后，细胞容易贴壁生长
。

大鼠DNA甲基转移酶1(DNMT1)检测试剂盒 ，英文名： DNMT1 ELISA Kit

Mouse stem cell factor / mast cell growth factor (SCF/MGF) ELISA Kit 小鼠干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)检测试剂盒

ELISA 小鼠血管内皮细胞生长因子受体1(mouse VEGF-R1)  进口分装

CLIAKitforICTPELISAKit小鼠Ⅰ型胶原交联羧基末端肽

通用型A含量比色法定量检测试剂盒20次

ELISAKitDHT大鼠双氢睾同

HA重组甲型流感 H4N8 (A/chicken/Alabama/1/1975) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

PMP-22(Peripheral Myelin Protein 0.5mgPMP-22(Peripheral Myelin Protein) 外周髓鞘蛋白-22多肽

TNFSF11重组人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 标签) Protein

CS Protein Human 重组人 Citrate synthase / CS 蛋白

FCGR2B Protein Human 重组人 CD32b / FCGR2B 蛋白

PMP-22(Peripheral Myelin Protein 0.5mgPMP-22(Peripheral Myelin Protein) 外周髓鞘蛋白-22多肽

CS Protein Human 重组人 Citrate synthase / CS 蛋白

HA重组甲型流感 H4N8 (A/chicken/Alabama/1/1975) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

FCGR2B Protein Human 重组人 CD32b / FCGR2B 蛋白

TNFSF11重组人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 标签) Protein

小鼠前列腺酸性0酸酶(PAP)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat maix metalloproteinase 4 (MMP-4) ELISA Kit 大鼠基质金属蛋白酶4(MMP-4)检测试剂盒

HumanMetallothionein,MTELISAKit 人金属硫蛋白(MT)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

guineapigansforminggrowthfactorβ1,TGF-β1检测试剂盒豚鼠转化生长因子β1(TGF-β1)检测试剂盒规格：96T/48T

真菌/酵母细胞内氧化应激活性氧(ROS)荧光测定试剂盒(过氧亚硝基阴离子)20次

MouseBonemorphogeneticprotein4,BMP-4ELISAKit小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)检测试剂盒规格：96T/48T

小鼠肺小动脉内皮细胞小鼠0脂酶A2(PL-A2)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠0酸葡萄糖变位酶(PGM)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠0酸肌醇3激酶(PI3K)检测试剂盒      试剂盒   组装/原装

小鼠0酸化腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行
。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁
。

本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗
，非药用
，非食用