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细胞简介：

兔视网膜Muller分离自视网膜组织；视网膜居于眼球壁的内层
，是一层透明的薄膜。视网膜由色素上皮层和视网膜感觉层组成
，两层间在病理情况下可分开，称为视网膜脱离。色素上皮层与脉络膜紧密相连
，由色素上皮细胞组成


，它们具有支持和营养光感受器细胞
、遮光、散热以及再生和修复等作用

。组织学上视网膜分为10层，由外向内分别为：色素上皮层、视锥、视杆细胞层
、外界膜、外颗粒层
、外丛状层、内颗粒层、内丛状层、神经节细胞层

、神经纤维层
、内界膜。视网膜内层为衬于血管膜内面的一层薄膜，有感光作用；后部鼻侧有一视神经乳头。视网膜上的感觉层是由三个神经元组成

。神经元是视细胞层，专司感光
，它包括锥细胞和杆细胞。视杆细胞主要在离中心凹较远的视网膜上，而视锥细胞则在中心凹处多。层叫双节细胞，约有10到数百个视细胞通过双节细胞与一个神经节细胞相联系，负责联络作用。第三层叫节细胞层
，专管传导。视网膜是一层菲薄的但又非常复杂的结构
，它贴于眼球的后壁部，传递来自视网膜感受器冲动的神经纤维跨越视网膜表面，经由视神经到达出口
。视网膜的分辨力是不均匀的
，在黄斑区，其分辨能力强。视网膜Muller细胞作为视网膜中的主要胶质细胞，大约占视网膜胶质细胞的90%

，因而在视网膜疾病中起着何种作用也受到越来越多的关注。在超微结构水平上
，Muller细胞的胞质似乎比临近的其他细胞更高的电子密度
，更发达的内质网
，细胞核是典型的卵圆形或多角形。但在不同物种中或同一物种中的不同部位
，Muller细胞形态也会有所差异的。视网膜Muller细胞是一种特化的神经胶质细胞
，不仅具有维持视网膜的正常结构和功能的作用
，并调制视网膜神经元活动，还能参与多种病理过程
，尤其是眼底增殖性病变，如增生性玻璃体视网膜病变
、增生性糖尿病视网膜病变等
，体外培养Muller细胞是研究这些增殖性病变途径之一。

方法简介：

实验室分离的兔视网膜Muller采用胶原酶消化法和反复消化法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测

实验室分离的兔视网膜Muller经GS免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌
、酵母和真菌等
。

培养信息：

培养基：含FBS
、生长添加剂
、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态

：梭形

、多角形

传代特性
：可传2-3代

消化液

：0.25%

培养条件：气相：空气

，95%
；CO2
，5%

兔视网膜Muller体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。

实验报告
：

一、分离与培养
：

1、无菌条件下
，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次

，将组织剪成1mm3左右大小；

2
、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min

，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ 
，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后
，吸出培养基
，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二
、免疫荧光鉴定
：

1

、待心房肌细胞生长至80%融合时
，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min
，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min
，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min
，然后在室温条件下
，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗
，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜
；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h
；

6
、用PBS冲洗3次
，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照
。

公司正在出售的产品：

兔子促甲状腺素(TSH)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔子雌二醇(E2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

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GAD1重组人 GAD67 / GAD1 蛋白 Protein

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兔视网膜Muller细胞大鼠交联物(PY)试剂盒
，英文名
： PY ELISA Kit

Mouse beta hexosaminidase A (beta -hexosaminidase A) ELISA Kit 小鼠β氨基己糖苷酶A(β-hexosaminidase A)试剂盒

ELISA 小鼠碱性成纤维生长因子(mouse b-FGF/FGF-2)  进口分装

CLIAKitforKAF/ARELISAKit大鼠角化细胞内分泌因子/双调蛋白

通用型蛋白巯基/结合巯基含量荧光定量试剂盒20次

ELISAKitMBP大鼠主要碱性蛋白

注意事项
：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液
、浑浊等现象
，若有上述现象发生请及时和242net必赢联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基

、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题
，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面
，显微镜下观察细胞状态。因运输问题

，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h
。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清
。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片
，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和242net必赢联系，告知细胞的具体情况，以便242net必赢的技术人员跟踪回访直至问题解决
。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注
：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞
，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞
。收到细胞后次传代建议1：2传代 。

9.注意
： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿
。不是1个T25瓶传2个10cm皿
。