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① 组织块培养法

组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法
。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞
，如白血病细胞、淋巴细胞
、骨髓细胞

、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化
，可采用低速离心分离，直接培养
，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养
。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后
，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养
，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称
：兔卵巢微血管内皮细胞

英文名称：Rabbit Ovarian Microvascular endothelial Cells

组织来源：卵巢

产品规格
：5×105cells/T25细胞培养瓶

兔卵巢微血管内皮分离自卵巢组织
；卵巢是雌性动物的生殖器官

，卵巢的功能是产生卵以及类固醇激素。卵巢的位置与睾丸相同
，仅左侧发育（右侧已退化）

，呈葡萄状，均为处于不同发育时期的卵泡，卵泡呈黄色，卵巢表面密布血管。卵巢的大小与年龄和产卵期有关。大多数脊椎动物有两个卵巢
，但是部分鱼类的两个卵巢融合为单个结构
，而所有鸟类只有左侧卵巢有机能。卵巢是位于子宫两侧的一对卵圆形的生殖器官
，它的外表有一层上皮组织，其下方有薄层的结缔组织。卵巢的内部结构可分为皮质和髓质。皮质位于卵巢的周围部分，主要由卵泡和结缔组织构成
；髓质位于中央，由疏松结缔组织构成，其中有许多血管

、淋巴管和神经
。微血管又称毛细血管
。分布于各种组织和细胞间的微细的血管。介于微动脉和微静脉之间

。平均直径7-9微米，数量极多

，成网状分布。管壁由一层内皮细胞及一薄层基膜组成，厚约0.5微米。基膜外面有薄层结缔组织，其中有纤维细胞、巨噬细胞和周细胞等。细的微血管由一个内皮细胞围成管腔
，较粗的微血管由2-3个内皮细胞围成。分布于肌肉组织

、神经组织和结缔组织中的微血管
，内皮细胞间为缝隙连接（缝隙宽150埃）
，称连续微血管。血管内皮细胞在器官和组织的结构和功能上起着非常重要的作用。并与多种疾病的发生与发展有关。近年来血管内皮细胞在炎症
、休克等一系列病理生理改变中的重要性愈来愈受到人们的重视。研究发现，不同来源的内皮细胞在生物学特征
、结构和功能等方面均存在一定差别，而同是微血管内皮细胞，它们又存在器官和组织的特异性。

实验室分离的兔卵巢微血管内皮采用胶原酶-混合消化法结合密度梯度离心法、后通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测

实验室分离的兔卵巢微血管内皮经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上
，且不含有HIV-1
、HBV、HCV、支原体、细菌
、酵母和真菌等
。

包被条件：PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）

培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率
：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态
：内皮细胞样

传代特性：可传2-3代

消化液
：0.25%

培养条件
：气相：空气，95%；CO2，5%

兔卵巢微血管内皮体外培养周期有限
；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态
。

取材→分离→培养和维持

1
、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型、分化程度、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖，必须将现有的组织块充分散开
，使细胞解离出来
。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层
，这样可根据需要收获目的细胞

。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密
，为了使组织中的细胞充分分散
，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法
。

① 机械分散法

特点:简便

、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)
，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松
，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长
。

大鼠促卵泡素(FSH)检测试剂盒 ，英文名
： FSH ELISA Kit

Mouse 17 hydroxyprogesterone (17-OHP) ELISA Kit 小鼠17羟孕酮(17-OHP)检测试剂盒

ELISA 小鼠N端前脑素(mouse -proBNP)  进口分装

CLIAKitforLHRH(MouseLeinizingHormone-ReleasingHormone)ELISAKit小鼠黄体生成素释放激素

通用型HCV(HEPATITISVIRUSC)病毒定性检测试剂盒20次

ELISAKitSJA槐凝集素

CA12重组人 Carbonic Anhydrase XII / CA12 蛋白 Protein

颗粒酶K(GZMK)重组蛋白 Recombinant Granzyme K (GZMK)

MRPL44重组人 MRPL44 蛋白 Protein

IFNAR2 Protein Human 重组人 IFNAR2 / IFNABR 蛋白

HA Protein H2N2 重组甲型流感 H2N2 (A/Guiyang/1/1957) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

颗粒酶K(GZMK)重组蛋白 Recombinant Granzyme K (GZMK)

IFNAR2 Protein Human 重组人 IFNAR2 / IFNABR 蛋白

CA12重组人 Carbonic Anhydrase XII / CA12 蛋白 Protein

HA Protein H2N2 重组甲型流感 H2N2 (A/Guiyang/1/1957) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

MRPL44重组人 MRPL44 蛋白 Protein

小鼠11β羟基类固醇脱氢酶(11β-HSD)检测试剂盒 96T/48T

Human gasin cell aibody (GCA) ELISA Kit 人胃泌素细胞抗体(GCA)检测试剂盒

PorcinePrednisoloneELISAKit 猪龙(Prednisolone)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanCpGoligodeoxynucleotide,CpG-ODN检测试剂盒人未甲基化寡聚脱氧核苷酸(CpG-ODN)检测试剂盒规格：96T/48T

组织COT激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

HumanProteinCarbonyl，PCELISAKit人羰基化蛋白(PC)检测试剂盒规格
：96T/48T

兔卵巢微血管内皮细胞甜菜碱含量测定试剂盒   可见分光光度法   50管/48样

二0酸核糖羧化酶/加氧酶（Rubisco）试剂盒   紫外分光光度法   50管/48样

二0酸核糖羧化酶/加氧酶（Rubisco）试剂盒   紫外分光光度法   25管/24样

漆酶试剂盒   可见分光光度法   50管/24样

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行
。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的
，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用
，非食用