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细胞简介
：

大鼠淋巴结淋巴分离自淋巴结
；淋巴结是哺乳类的周围淋巴器官，由淋巴细胞集合而成。呈豆形
，位于淋巴管行进途中，是产生免疫应答的重要器官之一。淋巴结表面包有被膜，被膜的结缔组织伸入淋巴结内形成小梁，构成淋巴结的支架
。被膜下为皮质区
，淋巴结的中心及门部为髓质区
。皮质区有淋巴小结、弥散淋巴组织和皮质淋巴窦（简称皮窦），髓质包括由致密淋巴组织构成的髓索和髓质淋巴窦（简称髓窦）。淋巴窦的窦腔内有许多淋巴细胞和巨噬细胞
，从输入淋巴管流来的淋巴液入皮窦再流向髓窦，最后经输出淋巴管离开淋巴结。淋巴结的主要功能是滤过淋巴液

，产生淋巴细胞和浆细胞，参与机体的免疫反应。淋巴结肿大或疼痛常表示其属区范围内的器官有炎症或其他病变。主要功能是滤过淋巴液
，产生淋巴细胞和浆细胞，参与机体的免疫反应

；当局部感染时，细菌、病毒或癌细胞等可沿淋巴管侵入

，引起局部淋巴结肿大
。如该淋巴结不能阻止和消灭它们，则病变可沿淋巴管的流注方向扩散和转移。淋巴结淋巴细胞是白细胞的一种，由次级淋巴器官淋巴结产生，是机体免疫应答功能的重要细胞成分；细胞为圆形细胞核，细胞质少


。成熟淋巴细胞需依赖抗原刺激而分化增殖，继而发挥其免疫功能

。

方法简介：

公司实验室分离的大鼠淋巴结淋巴采用分离淋巴结组织

、研磨获取单细胞悬液后通过密度梯度离心法制备而来
，细胞总量约为1×10?cells/瓶
。

质量检测

公司实验室分离的大鼠淋巴结淋巴经过检测，且不含有HIV-1
、HBV、HCV
、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 悬浮

细胞形态 圆形

传代特性 不增殖；不传代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

实验报告：

一、分离与培养：

1
、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；

2
、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s
，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置

，重复此步骤2-3次，直至组织被消化
；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液
，1200r/min 离心10min，弃去上清
，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ 
，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二、免疫荧光鉴定：

1
、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次
，每次10min
，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2、PBS冲洗细胞2次
，每次10min，然后在4℃条件下
，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次
，每次10min，然后在室温条件下
，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜

；

5
、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1
：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次，每次10min
，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照
。

公司正在出售的产品：

大鼠肺表面活性物质相关蛋白C(SP-C)检测试剂盒

，英文名： SP-C ELISA Kit

Porcine macrophage inflammatory protein 1 alpha (MIP-1 alpha /CCL3) ELISA Kit 猪巨噬细胞性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)检测试剂盒

转基因植物PRSV基因核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T

CLIAKitforMAPKAPK3(Humanmitogen-activatedproteinkinase-activatedproteinkinase3)ELISAKit人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3

体液氧化应激活性氧(ROS)鲁米诺化学发光法定量检测试剂盒50次

ELISAKitMrNV罗氏沼虾诺达病毒

BGN重组小鼠 Biglycan / PG-S1 / BGN 蛋白 (Fc 标签) Protein

肝脂酶(LIPC)重组蛋白 Recombinant Lipase, Hepatic (LIPC)

PDHA1重组人 PDHA1 / C54G1 蛋白1 (aa 30-390) Protein

CCL7 Protein Human 重组人 MCP-3 / CCL7 蛋白

THPO Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白

CGRP (calcitonin gene related peptide, CGRP 0.5mgCGRP (calcitonin gene related peptide, CGRP) 降钙素基因相关肽

CCL7 Protein Human 重组人 MCP-3 / CCL7 蛋白

CD28重组小鼠 CD28 蛋白 (His & Fc 标签) Protein

MBL1 Protein Mouse 重组小鼠 MBL1 蛋白

CMBL重组人 CMBL 蛋白 Protein

小鼠乙型肝表面抗原(HBsAg)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human soluble cluster of differeiation 21 (CR2/sCD21) ELISA Kit 人可溶性白细胞分化抗原21(CR2/sCD21)检测试剂盒

Humancytokeratin20,CK-20ELISAKit 人细胞角蛋白20(CK-20)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitfor6-keto-PGF1aELISAKit大鼠6同前列腺素F1a

饮料D-乳酸比色法定量检测试剂盒20次

Mousemajorhistocompatibilitycomplex-Ⅱ,MHC-Ⅱ/H-2ⅡELISAKit小鼠主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHC-Ⅱ/H-2Ⅱ检测试剂盒规格：96T/48T

大鼠淋巴结淋巴细胞血管紧张素1   英文名称：   Human Angiotensin 1   规格：      英文缩写：   AT1

血管紧张素2受体1抗体   英文名称
：   Human Angiotensin 2 receptor 1 aibody   规格

：      英文缩写：   AT2R1-Ab

血管紧张素2受体1型   英文名称

：   Human Angiotensin 2 receptor Type 1   规格：      英文缩写
：   AG2

血管紧张素2   英文名称：   Human Angiotensin 2   规格：      英文缩写

：   Ang 2/AT2

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液
、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和242net必赢联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息

，如细胞形态、所用培养基
、血清比例
、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题
，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态
。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象
。观察好细胞状态后
，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h
。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，
，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中
，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片
，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和242net必赢联系，告知细胞的具体情况，以便242net必赢的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞
，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1：2传代 。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿
。不是1个T25瓶传2个10cm皿
。