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细胞简介：

颈位于下部，近似圆锥体，长 2.5～3cm
，上端与体相连，下端深入。宫颈的大小与宫体比例随年龄及状态等而变化
。

宫颈壁由黏膜
、肌层和外膜组成。其中，粘膜层主要是由粘膜上皮细胞构成。

细胞特性

：

1） 细胞来源于实验动物的正常组织。

2) 细胞鉴定：PCK荧光染色为阳性
。

3) 经鉴定细胞纯度高于90%。

4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV
、支原体
、
、酵母和。

5) 细胞生长方式
：铺路石样，多角形细胞，贴壁培养。

推荐培养基：

242net必赢推荐使用 delf原代 上皮 细胞培养体系 作为该细胞的培养试剂

。

实验报告：

一、分离与培养：

1
、无菌条件下
，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min
，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清
，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3
、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次
，直至组织被消化
；

4
、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液
，1200r/min 离心10min，弃去上清
，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基
，按实验需要接种于6孔板中继续培养
；二、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基

，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2、PBS冲洗细胞2次
，每次10min
，然后在4℃条件下
，用0.1％Triton X-100透膜15min
；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜
；

5
、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1
：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照
。

公司正在出售的产品
：

大鼠叉头框蛋白P3(FoxP3)检测试剂盒

，英文名： FoxP3 ELISA Kit

Mouse L phenylalanine ammonia lyase (PAL) ELISA Kit 小鼠L苯解氨酶(PAL)检测试剂盒

ELISA 小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(mouse GM-CSF)  进口分装

CLIAKitforLDH(HumanLactateDehydrogenase)ELISAKit人乳酸脱氢酶

通用型N-乙酰转移酶(NAT)活性高效液相层析法(HPLC)定量检测试剂盒20次

ELISAKitIFN-γ猴γ干扰素

CDH13重组大鼠 CDH13 / Cadherin-13 / H Cadherin 蛋白 Protein

DAD1 (dopamine D1 receptor 1mgDAD1 (dopamine D1 receptor) 多巴胺受体-D1抗原

IL16重组人 IL16 / Interleukin-16 蛋白 Protein

ENTPD3 Protein Human 重组人 ENTPD3 / NTPDase3 / CD39L3 蛋白

C Protein Mouse 重组小鼠 C / SLAMF2 / BCM1 蛋白

DAD1 (dopamine D1 receptor 1mgDAD1 (dopamine D1 receptor) 多巴胺受体-D1抗原

ENTPD3 Protein Human 重组人 ENTPD3 / NTPDase3 / CD39L3 蛋白

CDH13重组大鼠 CDH13 / Cadherin-13 / H Cadherin 蛋白 Protein

C Protein Mouse 重组小鼠 C / SLAMF2 / BCM1 蛋白

IL16重组人 IL16 / Interleukin-16 蛋白 Protein

小鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat soluble receptor activator of nuclear factor kappa B ligand (sRANKL) ELISA Kit 大鼠可溶性核因子κB受体活化因子配基(sRANKL)检测试剂盒

Humaecombinationactivatinggene1,RAG-1ELISAKit 人重组激活基因1(RAG-1)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

Humanai-gasicparietalcellaibody,AGPA/PCA检测试剂盒人抗网硬蛋白抗体(ARA)检测试剂盒规格：96T/48T

植物赖(lysine)含量化学比色法定量检测试剂盒20次

HumanVitaminB6
，VB6ELISAKit人B6(VB6)检测试剂盒规格：96T/48T

大鼠宫颈上皮细胞小鼠补体成分5   英文名称
：   Mouse Compleme Compone 5   规格：      英文缩写：   C5

小鼠结缔组织生长因子   英文名称
：   Mouse Connective Tissue Growth Factor   规格
：      英文缩写：   CTGF

小鼠皮质   英文名称：   Mouse Coicosterone   规格
：      英文缩写

：   CO

小鼠肌酐   英文名称：   Mouse Creatinine   规格：      英文缩写：   CT

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液
、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和242net必赢联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态
、所用培养基、血清比例

、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后
，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h
。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养
。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养
。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流
。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况
，请及时和242net必赢联系
，告知细胞的具体情况，以便242net必赢的技术人员跟踪回访直至问题解决
。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注
：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞
。收到细胞后次传代建议1：2传代 
。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿
。