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① 组织块培养法

组织块培养是常用
、简便易行和成功率较高的原代培养方法
。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁
，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞
、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化
，可采用低速离心分离
，直接培养

，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称
：小鼠心脏干细胞

英文名称
：Mouse Cardiac Stem Cells

组织来源
：心脏组织

产品规格
：5×105cells/T25细胞培养瓶

小鼠心脏干分离自心脏组织；心脏是脊椎动物身体中重要的一个器官，主要功能是为血液流动提供压力
，把血液运行至身体各个部分。心脏由心肌构成，左心房、左心室、右心房、右心室四个腔组成。左右心房之间和左右心室之间均由间隔隔开
，故互不相通
，心房与心室之间有瓣膜（房室瓣）
，这些瓣膜使血液只能由心房流入心室
，而不能倒流
。心脏的作用是推动血液流动
，向器官
、组织提供充足的血流量，以供应氧和各种营养物质，并带走代谢的终产物（如二氧化碳、无机盐、尿素和尿酸等），使细胞维持正常的代谢和功能

。研究发现
，心脏干细胞是一种多潜能细胞，具有再生和克隆能力，并可分化为心肌细胞、平滑肌细胞和血管内皮细胞。体内研究显示，从心脏中分离出的心脏干细胞，经体外简单培养、增殖和标记后，移植到心肌梗死边缘区域，心梗血流动力学和心室壁厚度较对照组明显改善，心肌梗死边缘区域发现有标记的心肌细胞

、平滑肌细胞和内皮细胞。尽管其新生心肌细胞较小

，但表达一些特殊肌蛋白如心脏肌球蛋白重链
、α-肌动蛋白

、α-辅肌动蛋白
、连接蛋白等，证实了心脏干细胞对心肌梗死的修复作用
。干细胞移植治疗是目前心肌梗死和缺血性心脏病细胞重建的主要方法，成体干细胞中的c-kit阳性心脏干细胞因其来源于心脏，有定向心脏细胞系分化的趋势，体内外可以分化成心肌细胞
、血管内皮细胞和平滑肌细胞
，同时自体移植不存在免疫排斥反应及伦理问题已经成为目前研究的热点
。短期内获得治疗量的自体心脏干细胞是这一治疗应用于临床的关键所在
。因此

，研究一种新的分离培养方法可在短时期内获得大量纯度较高的自体c-kit阳性心脏干细胞成为目前干细胞领域研究的热点问题之一
。

公司实验室分离的小鼠心脏干采用机械剪碎组织
、胶原酶分次消化法结合差速贴壁
、心脏干细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的小鼠心脏干经c-kit免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上
，且不含有HIV-1

、HBV、HCV、支原体
、细菌、酵母和真菌等
。

包被条件 PLL（0.1mg/ml）

培养基 含FBS
、生长添加剂、Penicillin
、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 长梭形

传代特性 可传2-3代左右

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2
，5%

取材→分离→培养和维持

1

、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件
，直接影响细胞的体外培养。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型、分化程度、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖
，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞
。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。

① 机械分散法

特点:简便、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动

，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散
，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后
，细胞容易贴壁生长
。

大鼠角蛋白18(K18)检测试剂盒 ，英文名： K18 ELISA Kit

Mouse neuophil chemoatacta protein 2 (NAP-2/CXCL7) ELISA Kit 小鼠中性粒细胞趋化蛋白2(NAP-2/CXCL7)检测试剂盒

RatAi-SmoothMuscleAibody,ASMAELISAKit 大鼠抗平滑肌抗体(ASMA)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforFishCoisolELISAKit鱼类

细胞基质金属蛋白酶(MMP-10)活性荧光定量检测试剂盒20次

RatOsteopoin,OPNELISAKit大鼠骨桥素(OPN)检测试剂盒规格：96T/48T

ANGPT2重组小鼠 Angiopoietin-2 / ANG2 / ANGPT2 蛋白 Protein

碱性鞘0脂0酸二酯酶(Alk-Smase)重组蛋白 Recombinant Alkaline Sphingomyelinase (Alk-Smase)

PLS3重组人 PLS3 / Plastin 3 蛋白 Protein

DOT1L Protein Human 重组人 DOT1L / KMT4 蛋白

CD8A Protein Ferret 重组雪貂 CD8A / CD8 alpha chain 蛋白

碱性鞘0脂0酸二酯酶(Alk-Smase)重组蛋白 Recombinant Alkaline Sphingomyelinase (Alk-Smase)

DOT1L Protein Human 重组人 DOT1L / KMT4 蛋白

ANGPT2重组小鼠 Angiopoietin-2 / ANG2 / ANGPT2 蛋白 Protein

CD8A Protein Ferret 重组雪貂 CD8A / CD8 alpha chain 蛋白

PLS3重组人 PLS3 / Plastin 3 蛋白 Protein

小鼠抗盐抵抗的酸性0酸酶(AP)检测试剂盒 96T/48T

Human heat shock protein 60 (Hsp-60) ELISA Kit 人热休克蛋白60(Hsp-60)检测试剂盒

HumanPolySeriumAigen,PHSAELISAKit 人多聚血清蛋白(PHSA)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

Humanangiosestatin,ANG检测试剂盒人血管抑素/血管稳定蛋白(ANG)检测试剂盒规格：96T/48T

植物钙调蛋白(CaM)活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒20次

Hydroxycoicosteroids,17-OHCSELISAKit鸡17羟皮质类固醇(17-OHCS)检测试剂盒规格

：96T/48T

小鼠心脏干细胞小鼠固   英文名称
：   Aldosterone   规格：      英文缩写：   ALD

小鼠白蛋白   英文名称
：   Albumin   规格
：      英文缩写
：   ALB

小鼠乙酰羧化酶   英文名称：   Mouse Acetyl Coenzyme A Carboxylase   规格：      英文缩写

：   ACC

小鼠乙酰   英文名称：   Mouse Acetylcholine   规格：      英文缩写：   ACH

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁
。

本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗
，非药用，非食用