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细胞简介
：

小鼠外周血中性粒分离自外周血；外周血是除骨髓之外的血液
，临床上常用一些方法把骨髓中的造血干细胞释放到血液中，再在从血液中提取分离得到造血干细胞，242net必赢把这样得到的干细胞称为外周血干细胞，在二十一世纪初人类开始的生命方舟计划中提出外周血这一新概念。白细胞是一类无色
、球形
、有核的血细胞
。白细胞不是一个均一的细胞群，根据其形态、功能和来源部位可以分为三大类：粒细胞、单核细胞和淋巴细胞，其中粒细胞又可根据胞质中颗粒的染色性质不同，分为中性粒细胞、嗜酸粒细胞和嗜碱粒细胞三种。中性粒细胞是在瑞氏（Wright）染色血涂片中，胞质呈无色或极浅的淡红色，有许多弥散分布的细小的（0.2～0.4微米）浅红或浅紫色的颗粒。细胞核呈杆状或2～5分叶状
，叶与叶间有细丝相连。中性粒细胞具趋化作用、吞噬作用和杀菌作用
。中性粒细胞来源于骨髓，具有分叶形或杆状的核，胞浆内含有大量既不嗜碱也不嗜酸的中性细颗粒。这些颗粒多是溶酶体，内含髓过氧化酶、、碱性磷酸酶和酸性水解酶等丰富的酶类，与细胞的吞噬和消化功能有关。中性粒细胞在血液的非特异性免疫中起着十分重要的作用，它处于机体抵御微生物病原体，特别是在化脓性细菌入侵的线
，具有很强的吞噬活性，可吞噬细菌、衰老的红细胞
、抗原一抗体复合物和坏死的细胞等
。中性粒细胞内含有大量溶酶体酶，因此能将吞噬入细胞内的细菌和组织碎片分解。当中性粒细胞吞噬数十个细菌后，自身发生解体
，所释出的各种溶酶体酶类能溶解周围组织而形成脓液。中性粒细胞是人体内寿命短的细胞
，一般体外培养12-24h内活性稳定，48h活性下降，96h基本死亡。

方法简介：

公司实验室分离的小鼠外周血中性粒采用取外周血
、通过密度梯度离心法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶
。

质量检测

公司实验室分离的小鼠外周血中性粒经瑞氏染色法，纯度可达90%以上
，且不含有HIV-1、HBV

、HCV、支原体、细菌
、酵母和真菌等
。

培养信息：

培养基 含FBS
、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 悬浮

细胞形态 圆形

传代特性 不增殖

；不传代

消化液 0.25%

培养条件 气相

：空气
，95%
；CO2
，5%

实验报告：

一、分离与培养：

1
、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织

，然后用PBS将此组织块清洗2次
，将组织剪成1mm3左右大小
；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s
，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液
，自然沉淀并收集上清
，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3
、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液
，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置
，重复此步骤2-3次
，直至组织被消化

；

4
、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min
，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬
，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基

，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时
，弃去培养基
，用温育的PBS冲洗细胞2次
，每次10min
，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2

、PBS冲洗细胞2次，每次10min
，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下
，用4% BSA封闭细胞30min；

4
、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜
；

5
、PBS冲洗细胞3次，每次10min

，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次，每次10min
，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照
。

公司正在出售的产品：

血管内皮抑素 (Endostatin)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

内皮素 -1(Endothelin-1)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

内啡肽 - b (Endorphin- b )   作用
：   ELISA   规格：      进口分装

内皮细胞合酶 (eNOS)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

小鼠游离状腺原酸(Free-T3)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human ai histone aibody of ai -DNA (H2A-H2B) / two mer -DNA aibody ELISA Kit 人抗组蛋白(H2A-H2B)-DNA抗体/抗二聚体-DNA抗体试剂盒

Humanepithelialspecificaigen,ESAELISAKit 人上皮特异性抗原(ESA)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitfor8-iso-PG(Human8-isoprostaglandin)ELISAKit人8异前列腺素

异丁甲基细胞脂肪诱导生成比色法定量试剂盒20次

MouseMotilin,MTLELISAKit小鼠胃动素(MTL)试剂盒规格

：96T/48T

HA重组甲型流感 H7N9 (A/Zhejiang/ DTID-ZJU10/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

PAFR/PTAFR 血小板活化因子受体抗原 0.5mgPAFR/PTAFR 血小板活化因子受体抗原

LRP1重组人 LRP1 / A2MR / CD91 蛋白 (aa 786-1165) Protein

CCL23 Protein Human 重组人 CCL23 / MIP 3 蛋白

ALPL Protein Human 重组人 Alkaline Phosphatase / ALPL 蛋白

PAFR/PTAFR 血小板活化因子受体抗原 0.5mgPAFR/PTAFR 血小板活化因子受体抗原

CCL23 Protein Human 重组人 CCL23 / MIP 3 蛋白

HA重组甲型流感 H7N9 (A/Zhejiang/ DTID-ZJU10/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

ALPL Protein Human 重组人 Alkaline Phosphatase / ALPL 蛋白

LRP1重组人 LRP1 / A2MR / CD91 蛋白 (aa 786-1165) Protein

小鼠外周血中性粒细胞大鼠低氧诱导因子1α(HIF-1α)试剂盒 
，英文名： HIF-1α ELISA Kit

Porcine plasminogen activator inhibitor (PAI) ELISA Kit 猪纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)试剂盒

广州管圆线虫核酸试剂盒(荧光PCR法) 48T

CLIAKitforLRP-6(Humanlow-densitylipoprotein-receptor-relatedprotein)ELISAKit人低密度脂蛋白受体相关蛋白6

通用HRP酶联检测封闭溶液100毫升

ELISAKitsICAM-1鸡可溶性细胞间粘附分子1

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好
，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和242net必赢联系

。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等

，确保细胞培养条件一致
，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题
，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面
，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h
。

4. 贴壁细胞可以消化
，悬浮细胞直接混匀收集细胞
，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞
，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，
，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中
，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片
，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流

。由于运输的原因

，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和242net必赢联系
，告知细胞的具体情况，以便242net必赢的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注
：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞
。收到细胞后次传代建议1
：2传代 
。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿

。