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① 组织块培养法

组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中

，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞

，如白血病细胞、淋巴细胞
、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化
，可采用低速离心分离，直接培养

，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养
。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性

，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响
，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称：小鼠肾脏微血管内皮细胞

英文名称：Mouse Renal Microvascular Cells

组织来源：肾

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

小鼠肾脏微血管内皮分离自肾脏；肾脏是小鼠的重要器官，它的基本功能是生成尿液，借以清除体内代谢产物及某些废物、毒物，同时经重吸收功能保留水分及其他有用物质，如葡萄糖

、蛋白质

、氨基酸


、钠离子
、钾离子
、等，以调节水、电解质平衡及维护酸碱平衡。肾脏同时还有内分泌功能
，生成肾素
、促红细胞生成素
、活性3、前列腺素
、激肽等，又为机体部分内分泌激素的降解场所和肾外激素的靶器官。肾脏的这些功能
，保证了机体内环境的稳定
，使新陈代谢得以正常进行。肾脏内部的结构，可分为肾实质和肾盂两部分。在肾纵切面可以看到
，肾实质分内外两层：外层为皮质，内层为髓质
。肾皮质位于肾实质表层，富含血管，新鲜时呈红褐色，由一百多万个肾单位组成。每个肾单位由肾小体和肾小管所构成，部分皮质伸展至髓质锥体间，成为肾柱。肾髓质位于肾皮质的深面，血管较少，色淡红，为10-20个锥体所构成。肾锥体在切面上呈三角形。锥体底部向肾凸面，向肾门，锥体主要组织为集合管，锥体称肾乳头
，每一个乳头有10-20个乳头管，向肾小盏漏斗部开口。在肾窦内有肾小盏，为漏斗形的膜状小管
，围绕肾乳头
。肾锥体与肾小盏相连接
。每肾有7-8个肾小盏，相邻2-3个肾小盏合成一个肾大盏

。每肾有2-3个肾大盏
，肾大盏汇合成扁漏斗状的肾盂。肾盂出肾门后逐渐缩窄变细

，移行为输尿管。肾单位是肾脏结构和功能的基本单位

。肾小体包括肾小球和肾小囊。肾小体内有一个毛细血管团，称为肾小球，肾小球是个血管球
。它由肾动脉分支形成。肾小球外有肾小囊包绕。肾小囊分两层，两层之间有囊腔与肾小管的管腔相通。肾小管汇成集合管

。若干集合管汇合成乳头管，尿液由此流入肾小盏。微血管又称毛细血管。分布于各种组织和细胞间的微细的血管。介于微动脉和微静脉之间

。平均直径7-9微米，数量极多，成网状分布

。管壁由一层内皮细胞及一薄层基膜组成，厚约0.5微米
。基膜外面有薄层结缔组织
，其中有纤维细胞
、巨噬细胞和周细胞等

。细的毛细血管由一个内皮细胞围成管腔，较粗的毛细血管由2-3个内皮细胞围成
。分布于肌肉组织、神经组织和结缔组织中的毛细血管，内皮细胞间为缝隙连接（缝隙宽150埃），称连续毛细血管；分布于内分泌腺、肾脏等处的毛细血管
，除有缝隙连接外
，细胞本身有许多小孔，（孔径800-1000埃），称有孔毛细血管
；分布于肝、脾
、骨髓及某些内分泌腺的毛细血管，管腔扩大，称血窦。毛细血管的管壁薄、通透性大、管径细（8-10微米）、数量多、血流速度慢，这些特点使其成为血液与组织液进行物质交换的场所
，又称交换血管。血窦（sinusoid）由毛细血管管腔扩大而成，窦壁的一般结构与毛细血管壁相同，由单层内皮细胞构成，内皮细胞膜上有窗孔
。不同器官的窦壁结构各有差别。脾血窦的内皮细胞间有较宽裂隙；肝血窦内皮细胞是不连续的，有较宽的细胞隙（0.1-0.5微米）
；肝、脾血窦的基膜不完整或无基膜
，通透性比毛细血管大，较大的蛋白质和血细胞可以通过
。肝血窦壁内有枯否细胞

，脾血窦内外有巨噬细胞
，这两种细胞都有吞噬能力
，可吞噬清除血液中的异物、细菌等有害物质，是机体单核巨噬细胞系统的重要组成分。某些内分泌腺的血窦有连续的基膜。

实验室分离的小鼠肾脏微血管内皮采用胶原酶消化，结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测

实验室分离的小鼠肾脏微血管内皮经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体
、细菌
、酵母和真菌等
。

包被条件：PLL（0.1mg/ml）
，明胶（0.1%）

培养基
：含FBS、EGF
、bFGF、IGF、VEGF
、Heparin
、Hydrocortisone
、Penicillin
、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性
：贴壁

细胞形态：内皮细胞样

传代特性：可传2-3代

消化液
：0.25%

培养条件：气相：空气，95%；CO2
，5%

小鼠肾脏微血管内皮体外培养周期有限
；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。

取材→分离→培养和维持

1、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件
，直接影响细胞的体外培养。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型、分化程度、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密
，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料

，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法
。

① 机械分散法

特点:简便
、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织
。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)
，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散
，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液
，接种培养后，细胞容易贴壁生长。

大鼠能受体β3(ADRβ3)检测试剂盒
，英文名： ADRβ3 ELISA Kit

Mouse peosidine ELISA Kit (Peosidine) 小鼠戊糖素(Peosidine)检测试剂盒

RatVitaminK1,VK1ELISAKit 大鼠K1(VK1)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHBVpreS2Ag(HumanhepatitisBvirus)ELISAKit人乙型肝病毒前S2抗原

细胞α-L-岩藻糖苷酶(AFU)荧光定量检测试剂盒20次

swinemajorhistocompatibilitycomplexⅠ,MHCⅠ/SLAⅠELISAKit猪主要组织相容性复合体Ⅰ类(MHCⅠ/SLAⅠ)检测试剂盒规格：96T/48T

CD160重组食蟹猴 CD160 蛋白 Protein

Leptin receptor 瘦素受体(抗原 0.5mgLeptin receptor 瘦素受体(抗原)

GPA33重组人 GPA33 / Glycoprotein-A33 蛋白 Protein

DCLK1 Protein Human 重组人 DCAMKL1 / DCLK1 蛋白

MANF Protein Mouse 重组小鼠 MANF / ARMET 蛋白

Leptin receptor 瘦素受体(抗原 0.5mgLeptin receptor 瘦素受体(抗原)

DCLK1 Protein Human 重组人 DCAMKL1 / DCLK1 蛋白

CD160重组食蟹猴 CD160 蛋白 Protein

MANF Protein Mouse 重组小鼠 MANF / ARMET 蛋白

GPA33重组人 GPA33 / Glycoprotein-A33 蛋白 Protein

小鼠酪蛋白酶检测试剂盒 96T/48T

Human prostate specific aigen (PSA) ELISA Kit 人前列腺特异性抗原(PSA)检测试剂盒

Humaetinolbindingprotein4,RBP-4ELISAKit 人结合蛋白4(RBP-4)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

humanadrencocoicoopichormone,ACTH检测试剂盒人促肾上腺皮质激素(ACTH)检测试剂盒规格
：96T/48T

植物DNA甲基转移酶-1(MET-1)活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒20次

Mouseadiponectin,ADPELISAKit小鼠脂联素(ADP)检测试剂盒规格：96T/48T

小鼠肾脏微血管内皮细胞小鼠基质细胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠基质裂解素(ST2)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠基质金属蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠基质金属蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行
。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月
。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁
。

本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的
，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用