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① 组织块培养法

组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法
。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中
，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁
，使周边细胞能沿瓶壁向外生长
。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞
、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离
，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养
。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后
，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养
，器官培养可保持器官组织的相对完整性
，可用于重点观察细胞间的联系

、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用
。

产品名称：小鼠颞下颌关节软骨细胞

英文名称
：Mouse Temporomandibular Joint Chondrocyte Cells

组织来源
：软骨

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

小鼠颞下颌关节软骨分离自颞下颌关节软骨组织，颞下颌关节又称颞颌关节"或下颌关节"。由下颌头与颞骨下颌窝和关节结节组成，左右合成一联合关节，主理张口闭口和咀嚼运动
。关节囊松弛

，侧方为内、外侧韧带所加强。囊内的关节盘呈卵圆形，由纤维软骨组成，区分为前、中
、后三部分。上面呈鞍状，前凹后凸，与关节结节和下颌窝的凸凹轮廓相对应；下面凹正对下颌头，周缘与关节囊相接
，前缘与穿过关节囊的翼外肌腱相连。关节盘将关节腔分成上
、下两半。关节外更有蝶下颌韧带(蝶棘至下颌小舌)和茎突下颌韧带(茎突至下颌角)予以加固。关节软骨属于透明软骨
，表面光滑、呈淡蓝色
、有光泽
，它是由一种特殊的叫做致密结缔组织的胶原纤维构成的基本框架，这种框架呈半环形
，类似拱形球门
，其底端紧紧附着在下面的骨质上
，上端朝向关节面，这种结构使关节软骨紧紧与骨结合起来而不会掉下来
，同时当受到压力时候
，还可以有少许的变形，起到缓冲压力的作用。在这些纤维之间

，散在分布着软骨细胞，软骨细胞由浅层向深层逐渐由扁平样至椭圆或圆形的细胞组成，这些软骨细胞维持关节软骨的正常代谢。关节软骨没有神经支配，也没有血管
，其营养成分必须从关节液中取得，而其代谢废物也必须排至关节液中，关节软骨的这种营养代谢必须通过关节运动，使关节软骨不断的受到压力刺激才行，所以关节运动对于维持关节软骨的正常结构起重要的作用。关节软骨细胞位于关节软骨陷窝内。幼稚的关节软骨细胞位于关节软骨组织的表层，单个分布
、体积较小
、呈椭圆形，长轴与关节软骨表面平行

，越向深层的关节软骨细胞体积之间增大呈圆形，细胞核圆形或卵圆形、染色浅，细胞质弱嗜碱性，常见数量不一的脂滴。成熟的关节软骨细胞多2-8个成群分布于关节软骨陷窝内
，这些关节软骨细胞由同一个母细胞分裂增殖而成，称为同源细胞群。电镜下
，关节软骨细胞有突起和皱褶，细胞质内有大量的粗面内质网和发达的高尔基复合体及少量的线粒体

。在组织切片中，关节软骨细胞收缩为不规则形，在软骨囊和细胞之间出现较大的腔隙。体外培养的关节软骨细胞对于研究其生理功能
、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。

实验室分离的小鼠颞下颌关节软骨采用胶原酶联合消化制备而来
，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测

实验室分离的小鼠颞下颌关节软骨经Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光鉴定

，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1
、HBV
、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率
：每3-4天换液一次

生长特性
：贴壁

细胞形态：梭形

、多角形

传代特性
：可传2-3代左右

消化液：0.25%

培养条件：气相
：空气，95%；CO2，5%

小鼠颞下颌关节软骨体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养
，以此保证该细胞的佳培养状态。

取材→分离→培养和维持

1
、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件
，直接影响细胞的体外培养。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型
、分化程度
、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来

。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液、羊水
、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法
。

① 机械分散法

特点:简便、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状
，此时再采用机械法
，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。

大鼠雌激素(E)检测试剂盒 ，英文名： E ELISA Kit

Mouse collagen type IV (Col IV) ELISA Kit 小鼠Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)检测试剂盒

ELISA 小鼠CXC趋化因子配体16(mouse CXCL16)  进口分装

CLIAKitforLFA-3/CD58ELISAKit大鼠淋巴细胞功能相关抗原3

通用型HPV7(HUMANPAPILLOMAVIRUS-7)病毒定量PCR扩增检测试剂盒20次

ELISAKitET内毒素

CST3重组人 Cystatin C / CST3 蛋白 Protein

前列腺素I合酶(PTGIS)重组蛋白 Recombinant Prostaglandin I Synthase (PTGIS)

GMFG重组人 GMFG / Glia maturation factor, gamma 蛋白 Protein

FZD5 Protein Human 重组人 Frizzled-5 / FZD5 蛋白

HA Protein H10N9 重组甲型流感 H10N9 (A/duck/HongKong/562/1979) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

前列腺素I合酶(PTGIS)重组蛋白 Recombinant Prostaglandin I Synthase (PTGIS)

FZD5 Protein Human 重组人 Frizzled-5 / FZD5 蛋白

CST3重组人 Cystatin C / CST3 蛋白 Protein

HA Protein H10N9 重组甲型流感 H10N9 (A/duck/HongKong/562/1979) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

GMFG重组人 GMFG / Glia maturation factor, gamma 蛋白 Protein

小鼠病毒(MVM)检测试剂盒 96T/48T

Human squamous cell carcinoma related aigen (SCCAg) ELISA Kit 人鳞状细胞癌相关抗原(SCCAg)检测试剂盒

HumanCCAAT/enhancerbindingproteindeta,C/EBPδELISAKit 人CCAAT增强子结合蛋白δ(C/EBPδ)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

Chickenmajorhistocompatibilitycomplex,MHC/B检测试剂盒鸡主要组织相容性复合体(MHC/B)检测试剂盒规格：96T/48T

载玻片细胞NFKAPPABP65蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次

MouseFreeThyroxine,FT4ELISAKit小鼠游离甲状腺素(FT4)检测试剂盒规格：96T/48T

小鼠颞下颌关节软骨细胞兔子氧化低密度脂蛋白检测试剂盒   兔子氧化低密度脂蛋白试剂盒   规格型号
：96T/48T   兔子氧化低密度脂蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：检测试剂盒（进口分装），产品别名：兔子氧化低密度脂蛋白试剂盒、兔子氧化低密度脂蛋白eisa试剂盒   保存条件
：2-8℃   保质期：6个月

。

兔子血小板因子4检测试剂盒   兔子血小板因子4试剂盒   规格型号：96T/48T   兔子血小板因子4试剂盒
，规格型号
：96T/48T，来源：检测试剂盒（进口分装），产品别名：兔子血小板因子4试剂盒
、兔子血小板因子4eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

兔子血小板衍生生长因子检测试剂盒   兔子血小板衍生生长因子试剂盒   规格型号：96T/48T   兔子血小板衍生生长因子试剂盒，规格型号：96T/48T，来源
：检测试剂盒（进口分装），产品别名：兔子血小板衍生生长因子试剂盒、兔子血小板衍生生长因子eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

兔子血小板活化因子检测试剂盒   兔子血小板活化因子试剂盒   规格型号
：96T/48T   兔子血小板活化因子试剂盒
，规格型号：96T/48T
，来源
：检测试剂盒（进口分装），产品别名：兔子血小板活化因子试剂盒

、兔子血小板活化因子eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月
。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁
。

本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的
，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗
，非药用

，非食用