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① 组织块培养法

组织块培养是常用

、简便易行和成功率较高的原代培养方法
。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层
，以利于组织块粘着于瓶壁
，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化
，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养
，器官培养可保持器官组织的相对完整性

，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称
：小鼠颅盖造骨细胞

英文名称：Mouse Calvarial Osteoblast Cells

组织来源

：颅骨

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

小鼠颅盖造骨分离自颅骨组织
；造骨细胞（osteoblast）亦称成骨细胞。是参与骨组织形成的细胞。颅骨位于脊柱上方，由23块形状和大小不同的扁骨和不规则骨组成
。除下颌骨及舌骨外，其余各骨彼此借缝或软骨牢固连结，起着保护和支持脑、感觉器官以及消化器和呼吸器的起始部分的作用。颅分脑颅和面颅两部分。脑颅位于颅的后上部，内有颅腔，容纳脑，共8块
。面颅为颅的前下部分，包含眶

、鼻腔、口腔等结构，构成面部的支架
，共15块。成骨细胞是骨形成的主要功能细胞
，负责骨基质的合成、分泌和矿化。骨不断地进行着重建，骨重建过程包括破骨细胞贴附在旧骨区域，分泌酸性物质溶解矿物质
，分泌蛋白酶消化骨基质，形成骨吸收陷窝；其后

，成骨细胞移行至被吸收部位，分泌骨基质，骨基质矿化而形成新骨；破骨与成骨过程的平衡是维持正常骨量的关键。成骨细胞培养不仅有助于了解骨形成机制、骨骼系统疾病的分子和细胞学基础，也是药物筛选、生物材料开发和生物工程研究的重要手段。

实验室分离的小鼠颅盖造骨采用胶原酶消化法制备而来制备而来
，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测

实验室分离的小鼠颅盖造骨经ALP染色检测，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1
、HBV
、HCV
、支原体、细菌、酵母和真菌等
。

培养基
：含FBS

、生长添加剂
、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性


：贴壁

细胞形态：梭形、多角形

传代特性：可传3代左右

消化液：0.25%

培养条件：气相：空气
，95%；CO2，5%

小鼠颅盖造骨体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。

取材→分离→培养和维持

1
、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件

，直接影响细胞的体外培养
。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型、分化程度
、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖

，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来
。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液
、羊水
、胸水或腹水的悬液材料
，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟
。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密
，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。

① 机械分散法

特点:简便
、快速,但对组织机械损伤大

，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)
，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松
，由块状变成絮状

，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液
，接种培养后，细胞容易贴壁生长。

大鼠血管生成素2(ANGPT2)检测试剂盒

，英文名： ANGPT2 ELISA Kit

Mouse prostate specific aigen (PSA) ELISA Kit 小鼠前列腺特异性抗原(PSA)检测试剂盒

Mousemaixmetalloproteinase8/Neuophilcollagenase,MMP-8ELISAkit 小鼠基质金属蛋白酶8/中性粒细胞胶原酶(MMP-8)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHumanBeta-glucosidaseELISAKit人β葡糖苷酶

细胞DYRK1A激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

ELISAKitFASL大鼠凋亡相关因子配体

HSPB1重组人 HSP27 / HSPB1 蛋白 Protein

肾素(REN)重组蛋白 Recombinant Renin (REN)

MAPK14重组人 p38 alpha / MAPK14 蛋白 (Activated in vitro, His 标签) Protein

CTHRC1 Protein Human 重组人 CTHRC1 蛋白

HA Protein Influenza 重组甲型流感 H4N6 (A/Swine/Ontario/01911-1/99) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

肾素(REN)重组蛋白 Recombinant Renin (REN)

CTHRC1 Protein Human 重组人 CTHRC1 蛋白

HSPB1重组人 HSP27 / HSPB1 蛋白 Protein

HA Protein Influenza 重组甲型流感 H4N6 (A/Swine/Ontario/01911-1/99) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

MAPK14重组人 p38 alpha / MAPK14 蛋白 (Activated in vitro, His 标签) Protein

小鼠脑脊髓病毒(TMEV)检测试剂盒 96T/48T

Skin reactive factor / inflammatory factor (SRF/IF) ELISA Kit 人皮肤反应因子/性因子(SRF/IF)检测试剂盒

Humaetinoblastomatumorsuppressorprotein,pRBELISAKit 人视网膜母细胞瘤抑制蛋白(pRB)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

Human5-hydroxyindolaceticacid,5-HIAA检测试剂盒人5羟基吲哚乙酸(5-HIAA)检测试剂盒规格：96T/48T

真菌NADPH氧化酶活性比色法定量检测试剂盒20次(10样本)

MouseAi-ThrombinⅢ,AT-ⅢELISAKit小鼠抗Ⅲ抗体(AT-Ⅲ)检测试剂盒规格：96T/48T

小鼠颅盖造骨细胞小鼠抗双链DNA抗体/天然DNA抗体(dsDNA)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠抗平滑肌抗体(ASMA)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠抗受体(A)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠抗Ⅲ抗体(AT-Ⅲ)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月

。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁
。

本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的
，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用