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① 组织块培养法

组织块培养是常用
、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞

，如白血病细胞
、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养
，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性

，可用于重点观察细胞间的联系
、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称：小鼠肌腱干细胞

英文名称：Mouse Tendon Stem/Progenitor Cells

组织来源

：肌腱组织

产品规格
：5×105cells/T25细胞培养瓶

小鼠肌腱干分离自肌腱组织；肌腱是肌腹两端的索状或膜状致密结缔组织，便于肌肉附着和固定
。一块肌肉的肌腱分附在两块或两块以上的不同骨上
，是由于肌腱的牵引作用才能使肌肉的收缩带动不同骨的运动。每一块骨骼肌都分成肌腹和肌腱两部分，肌腹由肌纤维构成，色红质软，有收缩能力，肌腱由致密结缔组织构成，色乳白较硬
，没有收缩能力。肌腱把骨骼肌附着于骨骼。长肌的肌腱多呈圆索状，阔肌的肌腱阔而薄，呈膜状，又叫腱膜。此处的肌腹即为通常所说的红肌
，而肌腱即为白肌
，分别控制肌肉的力量

、爆发力和耐力
。肌腱干细胞（TSCs）是一种来源于肌腱组织的间充质干细胞
，其具有多向分化潜能

，并且在外源性前列腺素E2作用下异常分化。体外培养时该细胞群具有克隆形成能力
、自我更新及多向分化潜能等干细胞的普遍特性。肌腱干细胞可以被诱导向脂肪细胞、软骨样细胞、骨细胞分化
；在裸鼠模型中
，肌腱干细胞还可以形成肌腱样组织，软骨样组织以及腱-骨连接样组织等。相比骨髓间充质干细胞而言，TSCs具有更好的克隆形成能力和增殖能力，软骨相关基因和肌腱相关基因表达更高
，具有更好的成骨、成脂和成软骨能力，因此可以作为组织工程中的种子细胞。

公司实验室分离的小鼠肌腱干采用胶原酶

、混合消化法并通过肌腱干细胞专用培养基培养筛选制备而来

，细胞总量约为5×10?cells/瓶
。

质量检测

公司实验室分离的小鼠肌腱干经CD44免疫荧光鉴定

，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV
、HCV、支原体
、细菌
、酵母和真菌等。

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin
、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传2-3代

消化液 0.25%

培养条件 气相
：空气，95%；CO2，5%

取材→分离→培养和维持

1、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型
、分化程度、年龄等

⑥ 作好记录

2
、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料
，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞
。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料
，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液
，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法
。

① 机械分散法

特点:简便、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松
，由块状变成絮状，此时再采用机械法
，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后
，细胞容易贴壁生长

。

心肌肌钙蛋白1   英文名称

：   cardiac oponin 1   规格
：      英文缩写：   CTn1

Ⅰ型胶原C端肽   英文名称
：   C-telopeptide of type Ⅰ collagen   规格：      英文缩写
：   CTX-Ⅰ

   英文名称：   Cytochrome C   规格：      英文缩写：   Cytochrome C

CXC趋化因子受体1   英文名称
：   CXC chemokine receptor 1   规格：      英文缩写：   CXCR1

小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP-2)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat monocyte chemotactic protein 3 (MCP-3/CCL7) ELISA Kit 大鼠单核细胞趋化蛋白3(MCP-3/CCL7)试剂盒

Humanansferfactor,TFELISAKit 人转移因子(TF)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitfor25(OH)D3/25HVD3(Human25-DihydroxyvitaminD3)ELISAKit人25羟基3

饮料果胶化学比色法定量试剂盒20次

MouseL-Phenylalanineammonla-lyase,PALELISAKit小鼠L苯解氨酶(PAL)试剂盒规格：96T/48T

CSF1重组小鼠 M-CSF / CSF-1 蛋白 Protein

胱天蛋白酶5(CASP5)重组蛋白 Recombinant Caspase 5 (CASP5)

CD33重组人 CD33 / Siglec-3 蛋白 Protein

CD180 Protein Human 重组人 CD180 / RP105 / LY64 蛋白

CD2 Protein Canine 重组狗 CD2 蛋白 (Fc 标签)

胱天蛋白酶5(CASP5)重组蛋白 Recombinant Caspase 5 (CASP5)

CD180 Protein Human 重组人 CD180 / RP105 / LY64 蛋白

CSF1重组小鼠 M-CSF / CSF-1 蛋白 Protein

CD2 Protein Canine 重组狗 CD2 蛋白 (Fc 标签)

CD33重组人 CD33 / Siglec-3 蛋白 Protein

小鼠肌腱干细胞大鼠谷酸脱羧酶自身抗体(GAD-Ab)试剂盒 ，英文名： GAD-Ab ELISA Kit

Porcine ierferon gamma (IFN- gamma) ELISA Kit 猪γ干扰素(IFN-γ)试剂盒

产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)核酸试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T

CLIAKitformIgD(HumanmembraneIgD)ELISAKit人表面膜免疫球蛋白D

体液赖(lysine)含量荧光定量试剂盒20次

ELISAKitPROG牛孕激素/孕同

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。

本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的
，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用
，非食用