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① 组织块培养法

组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法
。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁
，使周边细胞能沿瓶壁向外生长
。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞
、骨髓细胞
、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化
，可采用低速离心分离，直接培养
，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用
。

产品名称：小鼠骨髓来源巨噬细胞

英文名称
：Mouse Bone Marrow-Derived Macrophage Cells

组织来源
：骨髓

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

小鼠骨髓来源巨噬分离自骨髓
；骨髓是机体的造血组织，位于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种：红骨髓和黄骨髓。红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞
。血小板有止血作用，白细胞能杀灭与抑制各种病原体，包括细菌
、病毒等；某些淋巴细胞能制造抗体。因此，骨髓不但是造血器官，它还是重要的免疫器官
。骨髓是存在于长骨(如肱骨
、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨质间的网眼中，是一种海绵状的组织
，能产生血细胞的骨髓略呈红色，称为红骨髓

。出生时，红骨髓充满全身骨髓腔，随着年龄增大，脂肪细胞增多
，相当部分红骨髓被黄骨髓取代，后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。巨噬细胞属免疫细胞，有多种功能，是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞较易获得，便于培养，并可进行纯化

。巨噬细胞属不繁殖细胞群

，在条件适宜下可生活2-3周
，多用做原代培养
，难以长期生存。巨噬细胞(Macrophages)是一种位于组织内的白血球，源自单核细胞
，而单核细胞又来源于骨髓中的前体细胞
。巨噬细胞和单核细胞皆为吞噬细胞，在脊椎动物体内参与非特异性防卫(先天性免疫)和特异性防卫(细胞免疫)。它们的主要功能是以固定细胞或游离细胞的形式对细胞残片及病原体进行噬菌作用(即吞噬以及消化)，并激活淋巴球或其他免疫细胞，令其对病原体作出反应。

公司实验室分离的小鼠骨髓来源巨噬采用分离骨髓单个核细胞经细胞因子诱导分化法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的小鼠骨髓来源巨噬经CD68免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上
，且不含有HIV-1、HBV、HCV
、支原体

、细菌
、酵母和真菌等。

培养基 含FBS、生长添加剂
、Penicillin
、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 巨噬细胞样

传代特性 属于终末分化细胞；属于不增殖细胞群

消化液 （12mM）

培养条件 气相：空气
，95%；CO2
，5%

取材→分离→培养和维持

1、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养
。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型、分化程度、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料

，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟
。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞
。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。

① 机械分散法

特点:简便、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织
。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动
，使团块膨松
，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡
，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液
，接种培养后，细胞容易贴壁生长。

大鼠肿瘤坏死因子配体超家族成员12(TNFSF12)检测试剂盒 ，英文名
： TNFSF12 ELISA Kit

Mouse soluble Endoglin (ENG/sCD105) ELISA Kit 小鼠可溶性Endoglin(ENG/sCD105)检测试剂盒

Mouseeosinophilchemotacticfactor,ECFELISAKit 小鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHumanImmunoglobulinG,IgGELISAKitG

微型RNA(miRNA)文库构建技术服务1个样本

ELISAKitMDC/CCL22大鼠巨噬细胞来源的趋化因子

C5重组人 Complement C5a 蛋白 Protein

角蛋白4(KRT4)重组蛋白 Recombinant Keratin 4 (KRT4)

PLA2G2D重组人 PLA2G2D / Phospholipase A2 IID 蛋白 (Fc 标签) Protein

CSH1 Protein Human 重组人 Placental Lactogen / CSH1 蛋白

HA Protein H5N1 重组甲型流感 H5N1 (A/bar-headed goose/Qinghai/1A/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

角蛋白4(KRT4)重组蛋白 Recombinant Keratin 4 (KRT4)

CSH1 Protein Human 重组人 Placental Lactogen / CSH1 蛋白

C5重组人 Complement C5a 蛋白 Protein

HA Protein H5N1 重组甲型流感 H5N1 (A/bar-headed goose/Qinghai/1A/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

PLA2G2D重组人 PLA2G2D / Phospholipase A2 IID 蛋白 (Fc 标签) Protein

小鼠牛小肠碱性0酸酶(CIAP)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human coagulation factor III (F III) ELISA Kit 人Ⅲ(FⅢ)检测试剂盒

HumanGliadinIgAELISAKit 人麦角蛋白IgA(Gliadin-IgA)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

Human15-lipoxygenase,15-LO/LOX检测试剂盒人15脂加氧酶(15-LO/LOX)检测试剂盒规格
：96T/48T

真菌/酵母细胞线粒体可溶性总蛋白制备试剂盒20次

MouseAquaporin3,AQP-3ELISAKit小鼠水通道蛋白3(AQP-3)检测试剂盒规格：96T/48T

小鼠骨髓来源巨噬细胞小鼠可溶性细胞间粘附分子 -1 (mouse sICAM-1)   作用：   ELISA   规格
：   96T   美国 R&D

小鼠干扰素 - a (mouse IFN- a )   作用：   ELISA   规格
：   72T   美国 R&D

小鼠干扰素 - g (mouse IFN- g )   作用：   ELISA   规格：   96T   法国 Diaclone

小鼠免疫球蛋白 E (mouse IgE)   作用：   ELISA   规格：   96T   美国 ADI

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行
。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁
。

本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗
，非药用，非食用