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① 组织块培养法

组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法
。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中

，瓶壁可预先涂以胶原薄层
，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长
。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞
、淋巴细胞、骨髓细胞
、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离
，直接培养
，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后
，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性
，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称
：小鼠骨骼肌微血管内皮细胞

英文名称
：Mouse Skeletal Muscle Microvascular Endothelial Cells

组织来源：骨骼肌

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

小鼠骨骼肌微血管内皮分离自四肢肌肉组织；骨骼肌又称横纹肌，肌肉中的一种

，约占全身重量的40%。骨骼肌纤维为长柱形的多核细胞，肌膜的外面有基膜紧密贴附
。属于横纹肌，横纹肌还包括心肌与内脏横纹肌
，其中骨骼肌主要分布于四肢。每块肌肉都是具有一定形态、结构和功能的器官
，有丰富的血管、淋巴分布
，在躯体神经支配下收缩或舒张，进行随意运动。微血管又称毛细血管。分布于各种组织和细胞间的微细的血管
。介于微动脉和微静脉之间
。平均直径7-9微米，数量极多，成网状分布

。管壁由一层内皮细胞及一薄层基膜组成，厚约0.5微米。基膜外面有薄层结缔组织
，其中有纤维细胞
、巨噬细胞和周细胞等。细的微血管由一个内皮细胞围成管腔，较粗的微血管由2-3个内皮细胞围成。分布于肌肉组织
、神经组织和结缔组织中的微血管

，内皮细胞间为缝隙连接（缝隙宽150埃），称连续微血管
。血管内皮细胞在器官和组织的结构和功能上起着非常重要的作用。并与多种疾病的发生与发展有关。近年来血管内皮细胞在炎症、休克等一系列病理生理改变中的重要性愈来愈受到人们的重视
。研究发现
，不同来源的内皮细胞在生物学特征、结构和功能等方面均存在一定差别，而同是微血管内皮细胞，它们又存在器官和组织的特异性。骨骼肌组织是动物体内含量多的组织，肌肉组织供血丰富

，是研究内皮细胞功能和血管生成的理想靶组织。

实验室分离的小鼠骨骼肌微血管内皮采用胶原酶消化结合差速贴壁法、专用培养基筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶
。

质量检测

实验室分离的小鼠骨骼肌微血管内皮经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

包被条件
：PLL（0.1mg/ml）
，明胶（0.1%）

培养基：含FBS
、生长添加剂、Penicillin
、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：内皮细胞样

传代特性
：可传2-3代

消化液：0.25%

培养条件
：气相：空气
，95%；CO2，5%

小鼠骨骼肌微血管内皮体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养
，以此保证该细胞的佳培养状态。

取材→分离→培养和维持

1、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型、分化程度、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖
，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液、羊水
、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层

，这样可根据需要收获目的细胞。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料
，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散
，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法
。

① 机械分散法

特点:简便、快速,但对组织机械损伤大
，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)
，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松
，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散

，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液
，接种培养后，细胞容易贴壁生长。

大鼠白介素3(IL-3)检测试剂盒 ，英文名： IL-3 ELISA Kit

Mouse soluble ierleukin 2 receptor beta chain (IL-2sR beta) ELISA Kit 小鼠白介素2可溶性受体β链(IL-2sRβ)检测试剂盒

ELISA 小鼠干扰素-a(mouse IFN-a)  进口分装

CLIAKitforINH-B(HumaninhibinB)ELISAKit人抑制素B

通用型柑橘顽固病螺原体(Spiroplasmacii;Sc)试剂盒20次

ELISAKitFree-T3大鼠游离三甲状腺原

FSTL3重组小鼠 FLRG / Fstl3 蛋白 Protein

CGA(Chromogranin A 0.5mgCGA(Chromogranin A) 嗜铬粒素A抗原

IL36B重组人 IL36B / IL1F8 蛋白 Protein

CSF2 Protein Human 重组人 GM-CSF / CSF2 蛋白

IL18R1 Protein Mouse 重组小鼠 IL-18R1 蛋白 (His & Fc 标签)

CGA(Chromogranin A 0.5mgCGA(Chromogranin A) 嗜铬粒素A抗原

CSF2 Protein Human 重组人 GM-CSF / CSF2 蛋白

FSTL3重组小鼠 FLRG / Fstl3 蛋白 Protein

IL18R1 Protein Mouse 重组小鼠 IL-18R1 蛋白 (His & Fc 标签)

IL36B重组人 IL36B / IL1F8 蛋白 Protein

小鼠(Coisol)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat hexokinase (HK) ELISA Kit 大鼠己糖激酶(HK)检测试剂盒

Humanai-Histoneaibody,AHAELISAKit 人抗组蛋白抗体(AHA)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

Human1,3-βDglucosidase,1,3-βD-Glu检测试剂盒人1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)检测试剂盒规格
：96T/48T

真菌/酵母细胞线粒体分离(粗提)试剂盒10次

MouseAialNaiureticPeptide,ANPELISAKit小鼠心肽(ANP)检测试剂盒规格：96T/48T

小鼠骨骼肌微血管内皮细胞小鼠类胰岛素生长因子-2   英文名称
：   Insulin like Growth Factor 1 2   规格：      英文缩写：   IGF-2

小鼠类胰岛素生长因子结合蛋白-1   英文名称
：   insulin-like growth factors binding protein-1   规格：      英文缩写
：   IGFBP-1

小鼠类胰岛素生长因子结合蛋白-2   英文名称：   insulin-like growth factors binding protein-2   规格：      英文缩写
：   IGFBP-2

小鼠类胰岛素生长因子结合蛋白-3   英文名称
：   insulin-like growth factors binding protein-3   规格：      英文缩写：   IGFBP-3

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行
。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。

本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用