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细胞简介：

小鼠肠静脉内皮分离自肠静脉；肠道指的是从胃幽门至门的消化管。肠是消化管中长的一段，也是功能重要的一段
。哺乳动物的肠包括小肠、大肠和直肠3大段
。大量的消化作用和几乎全部消化产物的吸收都是在小肠内进行的
，大肠主要浓缩食物残渣，形成粪便，再通过直肠经门排出体外。肠道堪称身体劳累的器官——每天不停地消化、吸收食物，以提供足够的养分，其实它的功能还远不止此——它还是机体内大的微生态系统
。

方法简介：

公司实验室分离的小鼠肠静脉内皮采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法
、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的小鼠肠静脉内皮经CD31免疫荧光鉴定
，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1
、HBV、HCV、支原体
、细菌
、酵母和真菌等
。

培养信息：

包被条件 PLL（0.1mg/ml）
，明胶（0.1%）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 内皮细胞样

传代特性 可传2-3代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气
，95%；CO2

，5%

实验报告
：

一
、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织

，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小
；

2
、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶）
，混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置
；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s
，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置
，重复此步骤2-3次
，直至组织被消化
；

4
、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min
，弃去上清
，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬
，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二
、免疫荧光鉴定
：

1

、待心房肌细胞生长至80%融合时
，弃去培养基
，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min
，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次


，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜
；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗
， 37℃条件下放置1h
；

6、用PBS冲洗3次，每次10min
，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

公司正在出售的产品：

大鼠补体因子D(adipsin)(CFD)检测试剂盒
，英文名： CFD ELISA Kit

Mouse substance P receptor (SP-R) ELISA Kit 小鼠P物质受体(SP-R)检测试剂盒

ELISA 小鼠D-二聚体(mouse D-Dimer)  进口分装

CLIAKitforLAT(MouseLinkerforactivationofTcell)ELISAKit小鼠T细胞活化连接蛋白

通用型VZV(VARICELLAZOSTER)病毒定性检测试剂盒20次

EPHB1重组食蟹猴 EphB1 / EPHT2 蛋白 Protein

IL-7Ra/CD127 peptide 白细胞介素-7受体a抗原 0.5mgIL-7Ra/CD127 peptide 白细胞介素-7受体a抗原

PLTP重组人 PLTP 蛋白 Protein

CRIP2 Protein Human 重组人 CRIP2 蛋白 (His & GST 标签)

TNFRSF1A Protein Mouse 重组小鼠 TNFR1 / CD120a / TNFRSF1A 蛋白 (Fc 标签)

IL-7Ra/CD127 peptide 白细胞介素-7受体a抗原 0.5mgIL-7Ra/CD127 peptide 白细胞介素-7受体a抗原

CRIP2 Protein Human 重组人 CRIP2 蛋白 (His & GST 标签)

EPHB1重组食蟹猴 EphB1 / EPHT2 蛋白 Protein

TNFRSF1A Protein Mouse 重组小鼠 TNFR1 / CD120a / TNFRSF1A 蛋白 (Fc 标签)

PLTP重组人 PLTP 蛋白 Protein

小鼠去甲(NA)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human urease related protein C (UreC) ELISA Kit 人尿素酶相关蛋白C(UreC)检测试剂盒

Humanai-Actinaibody,AAAELISAKit 人抗肌动蛋白抗体(AAA)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

guineapigniicoxide,NO检测试剂盒豚鼠(NO)检测试剂盒规格：96T/48T

真菌/酵母细胞可溶性总核蛋白制备试剂盒20次

Mousebradykinin,BKELISAKit小鼠血管舒缓(BK)检测试剂盒规格
：96T/48T

小鼠肠静脉内皮细胞小鼠免疫球蛋白D   英文名称

：   Mouse Immunoglobulin D   规格：      英文缩写：   IgD

小鼠吲哚胺2,3过氧化酶   英文名称：   Mouse Indoleamine 2, 3-Dioxygenase   规格
：      英文缩写


：   IDO

小鼠核因子κ B调控抑制蛋白   英文名称
：   Mouse Inhibitor κ Binding   规格：      英文缩写
：   IKBA

小鼠白细胞间介素 1   英文名称：   Mouse Ierleukin 1   规格：      英文缩写：   IL-1

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液
、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和242net必赢联系

。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息
，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等
，确保细胞培养条件一致
，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担
。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化
，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清
。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，，用新鲜的*培养基重悬细胞
，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态

，便于和我司技术部沟通交流
。由于运输的原因
，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和242net必赢联系
，告知细胞的具体情况
，以便242net必赢的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞
。收到细胞后次传代建议1：2传代 
。

9.注意
： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿。