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① 组织块培养法

组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中
，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长
。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞
、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化

，可采用低速离心分离，直接培养
，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养
。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系

、排列情况和相互影响
，以及局部环境的生物调节作用
。

产品名称：兔小气道上皮细胞

英文名称：Rabbit Small Airway Epithelial Cells

组织来源
：小气道

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

兔小气道上皮分离自小气道
；临床上通常将内径小于2mm的小细支气管称为小气道
。小气道具有气流阻力小

，但易阻塞的特点。在平静吸气时
，空气进入狭窄的鼻咽部，产生涡流

。由于小气道已无软骨支持
，在脱离纤维鞘嵌入肺组织后，管腔通畅性不象软骨性气道
，易于受胸腔的压力变化的影响。小气道上皮细胞形成连续呼吸道内层
，作为隔绝外界有害物质的物理和功能屏障发挥着的作用。小气道位于肺泡和气管的交界处，这些细胞在功能上能够调节免疫反应
、产生化学因子进行宿主防御、表达粘附分子

，并可能通过HLA-DR表达呈递抗原
；它们还能产生液体有助于肺液的平衡
。许多呼吸道疾病，如哮喘、支气管炎
、慢性阻塞性肺病和囊性纤维化，都涉及呼吸道表面上皮细胞的破坏
；小气道上皮细胞的培养可为防止呼吸道扩增疾病和重塑提供新的治疗选择
。小气道的生理功能特点
：①小气道阻力小；②气流速度慢；③可调节控制通气与血流比例
。

实验室分离的兔小气道上皮采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法
，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测

实验室分离的兔小气道上皮经PCK免疫荧光鉴定
，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1
、HBV、HCV、支原体、细菌
、酵母和真菌等。

包被条件：鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基
：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性
：贴壁

细胞形态：上皮细胞样

传代特性
：可传1-2代

消化液：0.25%

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

兔小气道上皮体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养
，以此保证该细胞的佳培养状态。

取材→分离→培养和维持

1

、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养
。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型
、分化程度
、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液

、羊水
、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟
。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层
，这样可根据需要收获目的细胞。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料
，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。

① 机械分散法

特点:简便、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织
。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松
，由块状变成絮状，此时再采用机械法
，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液
，接种培养后，细胞容易贴壁生长

。

大鼠颗粒酶B(GZMB)检测试剂盒 ，英文名
： GZMB ELISA Kit

Monkey endothelin 1 (ET-1) ELISA Kit内皮素1(ET-1)检测试剂盒

RatClaracellprotein,CC16ELISAKit 大鼠克拉拉细胞蛋白(CC16)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforFSHELISAKit大鼠促卵泡素

细胞环氧化酶(CYCLOOXYGENASE-1)活性荧光定量检测试剂盒20次

Ratplateletfactor3,PF3ELISAKit大鼠血小板因子3(PF-3)检测试剂盒规格：96T/48T

ANGPTL1重组狗 ANGPTL1 / Angiopoietin-like 1 蛋白 (Fc 标签) Protein

NIS(Na+/I-symporter;NIS 0.5mgNIS(Na+/I-symporter;NIS) 碘转运体蛋白(多肽抗原)

CSK重组人 CSK / C-Src kinase 蛋白 (GST 标签) Protein

IGSF8 Protein Human 重组人 PGRL / IGSF8 蛋白

FLRT2 Protein Mouse 重组小鼠 FLRT2 蛋白

NIS(Na+/I-symporter;NIS 0.5mgNIS(Na+/I-symporter;NIS) 碘转运体蛋白(多肽抗原)

IGSF8 Protein Human 重组人 PGRL / IGSF8 蛋白

ANGPTL1重组狗 ANGPTL1 / Angiopoietin-like 1 蛋白 (Fc 标签) Protein

FLRT2 Protein Mouse 重组小鼠 FLRT2 蛋白

CSK重组人 CSK / C-Src kinase 蛋白 (GST 标签) Protein

豚鼠血管生成素2(ANGPT2)检测试剂盒 ，英文名
： ANGPT2 ELISA Kit

Human secretory phospholipase A2 (sPLA2) ELISA Kit 人分泌型0脂酶A2(sPLA2)检测试剂盒

rabbitthyroxine,T4ELISAKit 兔子甲状腺素(T4)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforBcl-2ELISAKit大鼠B细胞淋巴瘤因子2

纤维蛋白溶酶原激活剂抑制物(PAI)活性荧光定量检测试剂盒20次

RabbitCompleme4,C4ELISAKit兔子补体蛋白4(C4)检测试剂盒规格：96T/48T

兔小气道上皮细胞食品   50T

FoodDNAExactionKit   100T

快速真菌   50T

FTFungalDNAKit   100T

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行
。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗
，非药用，非食用