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① 组织块培养法

组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中
，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞

、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化

，可采用低速离心分离，直接培养
，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后

，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响
，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称
：兔气管软骨细胞

英文名称：Rabbit Tracheal Chondrocyte Cells

组织来源：气管

产品规格
：5×105cells/T25细胞培养瓶

兔气管软骨分离自气管组织；气管（Trachea）

，呼吸器官的一部分
；为后壁略平的圆筒型管状
。上端平第六颈椎下缘
，与环状软骨相连；向下至第四、五胸椎体（相当胸骨角平面）交界处，分左
、右主支气管，分叉处称为气管杈。气管主要由14-16个半环状软骨构成，有弹性，软骨为“C"字形的软骨环，缺口向后，各软骨环以韧带连接起来
，环后方缺口处由平滑肌和致密结缔组织连接，保持了持续张开状态
。软骨由软骨细胞和细胞间质组成
。软骨内的基质呈凝胶状态，具有较大韧性
。软骨是以支持作用为主的结缔组织。软骨内不含血管和淋巴管，营养物由软骨膜内的血管中渗透到细胞间质中，再营养骨细胞
。根据细胞间质的不同可把软骨分为3种
，即透明软骨

、弹性软骨和纤维软骨
。透明软骨的基质是由胶原纤维、原纤维和周围无定形的基质组成
。在胚胎时期有临时支架作用，后来这种作用被骨代替
。成人的透明软骨主要分布在气管和支气管壁中、肋骨的胸骨端和骨的表面（关节软骨）
。

实验室分离的兔气管软骨采用-胶原酶联合消化法制备而来

，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶

。

质量检测

实验室分离的兔气管软骨经Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光鉴定
，纯度可达90%以上

，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养基：含FBS
、生长添加剂
、Penicillin

、Streptomycin等

换液频率：每3-4天换液一次

生长特性
：贴壁

细胞形态：梭形
、多角形

传代特性：可传5代左右；3代以内状态佳

消化液：0.25%

培养条件：气相：空气，95%；CO2
，5%

兔气管软骨体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。

取材→分离→培养和维持

1
、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件
，直接影响细胞的体外培养

。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型、分化程度
、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖
，必须将现有的组织块充分散开

，使细胞解离出来。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液
、羊水、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法
。

① 机械分散法

特点:简便
、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织
。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)
，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状
，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡
，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。

大鼠棕榈酰化膜蛋白6(MPP6)检测试剂盒 ，英文名
： MPP6 ELISA Kit

Mouse ai diuretic hormone / vasopressin / arginine vasopressin (ADH/VP/AVP) ELISA Kit 小鼠抗利尿激素/血管加压素/精加压素(ADH/VP/AVP)检测试剂盒

MouseMucin-5subtypeAC,MUC5ACELISAKit 小鼠粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHumanL-SelectinELISAkit人L选择素

土壤细菌DNA分离+高质化试剂盒20/50次

ELISAKitAT-Ⅲ大鼠抗Ⅲ抗体

HA重组甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

phospho-eIF4E(pSer209 0.5mgphospho-eIF4E(pSer209)(phospho-Eukaryotic translation initiation factor 4E) 0酸化eIF-4E(Ser209)抗原

PVRL1重组人 CD111 / Nectin-1 / PVRL1 蛋白 Protein

HEXB Protein Human 重组人 Hexosaminidase B / HEXB 蛋白

CTSA Protein Human 重组人 Cathepsin A / CTSA 蛋白

phospho-eIF4E(pSer209 0.5mgphospho-eIF4E(pSer209)(phospho-Eukaryotic translation initiation factor 4E) 0酸化eIF-4E(Ser209)抗原

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CTSA Protein Human 重组人 Cathepsin A / CTSA 蛋白

PVRL1重组人 CD111 / Nectin-1 / PVRL1 蛋白 Protein

小鼠P物质受体(SP-R)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat glucocoicoid receptor beta (GR- beta) ELISA Kit 大鼠糖皮质激素受体β(GR-β)检测试剂盒

Humani-iodothyronine,T3ELISAKit 人三甲状腺原(T3)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

HumancoagulationfactorⅦ,FⅦ检测试剂盒人Ⅶ(FⅦ)检测试剂盒规格：96T/48T

组蛋白脱乙酰化酶7(HDAC7)活性比色法定量检测试剂盒20次

Humaetinoblastomatumorsuppressorprotein,pRBELISAKit人视网膜母细胞瘤抑制蛋白(pRB)检测试剂盒规格

：96T/48T

兔气管软骨细胞兔热休克蛋白70(HSP-70)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔热休克蛋白40(HSP-40)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔热休克蛋白20(HSP-20)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行
。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用