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细胞简介
：

兔卵巢成纤维分离自卵巢组织；卵巢是雌性动物的生殖器官
，卵巢的功能是产生卵以及类固醇激素。卵巢的位置与睾丸相同
，仅左侧发育（右侧已退化），呈葡萄状，均为处于不同发育时期的卵泡，卵泡呈黄色
，卵巢表面密布血管。卵巢的大小与年龄和产卵期有关
。大多数脊椎动物有两个卵巢
，但是部分鱼类的两个卵巢融合为单个结构，而所有鸟类只有左侧卵巢有机能。卵巢是位于子宫两侧的一对卵圆形的生殖器官，它的外表有一层上皮组织

，其下方有薄层的结缔组织


。卵巢的内部结构可分为皮质和髓质。皮质位于卵巢的周围部分，主要由卵泡和结缔组织构成；髓质位于中央
，由疏松结缔组织构成，其中有许多血管、淋巴管和神经
。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来；成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显
。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化

；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的卵巢成纤维细胞呈圆形
、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁
，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形
，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态
，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡
。细胞融合
，并彼此连接成网状
；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布
。卵巢成纤维细胞大多分布于卵巢表面

，其主要特点和功能
：①成纤维细胞在体外易于培养；②卵巢损伤后，成纤维细胞能修复和重塑卵巢；③能在卵巢炎症时有效控制炎症扩散
。

方法简介
：

实验室分离的兔卵巢成纤维采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来

，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶
。

质量检测

实验室分离的兔卵巢成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌
、酵母和真菌等。

培养信息
：

培养基：含FBS
、生长添加剂、Penicillin
、Streptomycin等

换液频率
：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态

：成纤维细胞样

传代特性
：可传5代左右；3代以内状态佳

消化液：0.25%

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

兔卵巢成纤维体外培养周期有限
；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。

实验报告
：

一
、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织
，然后用PBS将此组织块清洗2次
，将组织剪成1mm3左右大小；

2
、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s

，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬
，接种于25cm2培养瓶
，放置于37℃ 

，5％CO2 培养箱中培养
；

5
、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min
，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min
，然后在4℃条件下
，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3
、PBS冲洗细胞2次

，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min
；

4

、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min

，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗
， 37℃条件下放置1h
；

6
、用PBS冲洗3次
，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

公司正在出售的产品：

小鼠抗单链DNA抗体/变性DNA抗体(ssDNA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠0脂酰丝酸(PS)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠0酸甘油酯(PC/CPG)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠Ⅰ型胶原交联羧基末端肽(ⅠCTP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

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Rat calcitonin (CT) ELISA Kit 大鼠降钙素(CT)试剂盒

Humanheatshockprotein27,HSP-27ELISAKit 人热休克蛋白27(HSP-27)试剂盒 96T/48T 进口分装

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正常人体肾组织微粒体组分(5毫克/毫升)500微升

Mouseai-cardiolipinaibodyIgA,ACA-IgAELISAKit小鼠抗心0脂抗体IgA(ACA-IgA)试剂盒规格：96T/48T

PLAT重组人 tPA / PLAT 蛋白 (Fc 标签) Protein

信号素3B(SEMA3B)重组蛋白 Recombinant Semaphorin 3B (SEMA3B)

STC1重组人 STC-1 / Stanniocalcin-1 蛋白 Protein

CTSV Protein Human 重组人 Cathepsin V / Cathepsin L2 / Preproprotein 蛋白

HA Protein H1N1 重组甲型流感 H1N1 (A/Brisbane/59/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

信号素3B(SEMA3B)重组蛋白 Recombinant Semaphorin 3B (SEMA3B)

CTSV Protein Human 重组人 Cathepsin V / Cathepsin L2 / Preproprotein 蛋白

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兔卵巢成纤维细胞大鼠兰尼定受体1(RYR1)试剂盒 ，英文名： RYR1 ELISA Kit

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细胞黑色素含量比色法定量试剂盒20次

RatprocollagenⅠN-terminalpeptide,PⅠNPELISAKit大鼠Ⅰ型前胶原N端前肽(PⅠNP)试剂盒规格：96T/48T

注意事项
：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象
，若有上述现象发生请及时和242net必赢联系
。

2. 仔细阅读细胞说明书
，了解细胞相关信息
，如细胞形态、所用培养基

、血清比例
、所需细胞因子等
，确保细胞培养条件一致
，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题
，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象
。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，
，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中
，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养
。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流
。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况
，请及时和242net必赢联系，告知细胞的具体情况
，以便242net必赢的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞
，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1
：2传代 
。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿
。不是1个T25瓶传2个10cm皿。