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细胞简介：

兔肌腱干分离自肌腱组织；肌腱是肌腹两端的索状或膜状致密结缔组织，便于肌肉附着和固定
。一块肌肉的肌腱分附在两块或两块以上的不同骨上
，是由于肌腱的牵引作用才能使肌肉的收缩带动不同骨的运动。每一块骨骼肌都分成肌腹和肌腱两部分，肌腹由肌纤维构成
，色红质软
，有收缩能力，肌腱由致密结缔组织构成

，色乳白较硬，没有收缩能力
。肌腱把骨骼肌附着于骨骼。长肌的肌腱多呈圆索状，阔肌的肌腱阔而薄，呈膜状，又叫腱膜。此处的肌腹即为通常所说的红肌
，而肌腱即为白肌，分别控制肌肉的力量、爆发力和耐力。肌腱干细胞（TSCs）是一种来源于肌腱组织的间充质干细胞，其具有多向分化潜能，并且在外源性前列腺素E2作用下异常分化。体外培养时该细胞群具有克隆形成能力、自我更新及多向分化潜能等干细胞的普遍特性
。肌腱干细胞可以被诱导向脂肪细胞
、软骨样细胞、骨细胞分化；在裸鼠模型中

，肌腱干细胞还可以形成肌腱样组织，软骨样组织以及腱-骨连接样组织等
。相比骨髓间充质干细胞而言，TSCs具有更好的克隆形成能力和增殖能力
，软骨相关基因和肌腱相关基因表达更高，具有更好的成骨、成脂和成软骨能力，因此可以作为组织工程中的种子细胞。

方法简介
：

公司实验室分离的兔肌腱干采用胶原酶、混合消化法并通过肌腱干细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的兔肌腱干经CD44免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1
、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等

。

培养信息
：

培养基 含FBS、生长添加剂
、Penicillin

、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右
；3代以内状态佳

消化液 0.25%

培养条件 气相
：空气

，95%；CO2
，5%

实验报告
：

一
、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织
，然后用PBS将此组织块清洗2次
，将组织剪成1mm3左右大小
；

2
、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s
，置37℃条件下消化10min
，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3
、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s

，置37℃消化10 min后

，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min
，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养
；

5
、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养
；二

、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min
，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2、PBS冲洗细胞2次

，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3
、PBS冲洗细胞2次

，每次10min
，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次
，每次10min
，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

公司正在出售的产品：

大鼠B-淋巴细胞趋化因子1(BLC1)检测试剂盒 ，英文名： BLC1 ELISA Kit

Human ula sensitive prostate specific aigen (PSA-U S) ELISA Kit 人超敏前列腺特异性抗原(PSA-U S)检测试剂盒

SheepIerleukin6,IL-6ELISAKit 绵羊白介素6(IL-6)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforC4BP(HumanC4bindingprotein)ELISAKit人C4结合蛋白

细菌冻存培养基100毫升

rabbitansformingGrowthfactorβ1,TGF-β1ELISAKit兔子转化生长因子β1(TGF-β1)检测试剂盒规格：96T/48T

EPHA1重组小鼠 EphA1 / EPH receptor A1 蛋白 Protein

氨基己糖苷酶Bβ(HEXβ)重组蛋白 Recombinant Hexosaminidase B Beta (HEXb)

NAA10重组人 NAA10 / ARD1A 蛋白 (His & GST 标签) Protein

IL4 Protein Human 重组人 IL4 / Interleukin-4 蛋白

ACVR2B Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 ACVR2B / ACTRIIB 蛋白 (Fc 标签)

谷脱羧酶2(GAD2)重组蛋白 Recombinant Glutamate Decarboxylase 2, Acid (GAD2)

IL4 Protein Human 重组人 IL4 / Interleukin-4 蛋白

PGF重组小鼠 PIGF / PLGF 蛋白 Protein

其他哺乳动物

CCL27重组人 CCL27 / CTACK 蛋白 Protein

豚鼠促卵泡素(FSH)检测试剂盒
，英文名： FSH ELISA Kit

Human peptide YY (Peptide-YY) ELISA Kit 人多肽YY(Peptide-YY)检测试剂盒

rabbitCollageypeⅡ,ColⅡELISAKit 兔子Ⅱ型胶原(ColⅡ)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforBeta-HCG人绒毛膜(夹心法一/二步法)

细菌纤维二糖酶(cellobiase)活性比色法定量检测试剂盒20次

rabbitHistamine,HISELISAKit兔子组胺(HIS)检测试剂盒规格：96T/48T

兔肌腱干细胞人中性粒细胞趋化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人趋化因子(fractalkine/CX3CL1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人碱性成纤维细胞生长因子9(bFGF-9)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人碱性成纤维细胞生长因子6(bFGF-6)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

注意事项
：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液
、浑浊等现象

，若有上述现象发生请及时和242net必赢联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息
，如细胞形态、所用培养基、血清比例

、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致

，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题
，责任由客户自行承担
。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面
，显微镜下观察细胞状态
。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片

，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h
。

4. 贴壁细胞可以消化
，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清
。加5 mL PBS重悬细胞
，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，，用新鲜的*培养基重悬细胞
，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片
，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和242net必赢联系，告知细胞的具体情况，以便242net必赢的技术人员跟踪回访直至问题解决
。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1：2传代 。

9.注意
： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿
。