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① 组织块培养法

组织块培养是常用
、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层
，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞
，如白血病细胞、淋巴细胞
、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化
，可采用低速离心分离
，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养


，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称
：兔骨髓来源巨噬细胞

英文名称：Rabbit Bone Marrow-Derived Macrophage Cells

组织来源：骨髓

产品规格
：5×105cells/T25细胞培养瓶

兔骨髓来源巨噬分离自骨髓
；骨髓是机体的造血组织，位于身体的许多骨骼内
。成年动物的骨髓分两种：红骨髓和黄骨髓
。红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞
。血小板有止血作用，白细胞能杀灭与抑制各种病原体
，包括细菌、病毒等；某些淋巴细胞能制造抗体。因此
，骨髓不但是造血器官

，它还是重要的免疫器官
。骨髓是存在于长骨(如肱骨
、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨质间的网眼中，是一种海绵状的组织，能产生血细胞的骨髓略呈红色，称为红骨髓。出生时
，红骨髓充满全身骨髓腔
，随着年龄增大
，脂肪细胞增多，相当部分红骨髓被黄骨髓取代
，后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓
。巨噬细胞属免疫细胞
，有多种功能，是研究细胞吞噬
、细胞免疫和分子免疫学的重要对象
。巨噬细胞较易获得，便于培养，并可进行纯化。巨噬细胞属不繁殖细胞群
，在条件适宜下可生活2-3周
，多用做原代培养，难以长期生存
。巨噬细胞(Macrophages)是一种位于组织内的白血球，源自单核细胞，而单核细胞又来源于骨髓中的前体细胞。巨噬细胞和单核细胞皆为吞噬细胞，在脊椎动物体内参与非特异性防卫(先天性免疫)和特异性防卫(细胞免疫)。它们的主要功能是以固定细胞或游离细胞的形式对细胞残片及病原体进行噬菌作用(即吞噬以及消化)，并激活淋巴球或其他免疫细胞，令其对病原体作出反应
。

实验室分离的兔骨髓来源巨噬采用分离骨髓单个核细胞经细胞因子诱导分化法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测

实验室分离的兔骨髓来源巨噬经CD68免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上
，且不含有HIV-1、HBV、HCV
、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率
：每2-3天换液一次

生长特性

：贴壁

细胞形态
：巨噬细胞样

传代特性

：属于终末分化细胞
；属于不增殖细胞群

消化液
：（12mM）

培养条件：气相：空气
，95%；CO2，5%

兔骨髓来源巨噬体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。

取材→分离→培养和维持

1

、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件

，直接影响细胞的体外培养。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型、分化程度、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖
，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来
。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液、羊水
、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟
。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层

，这样可根据需要收获目的细胞

。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料

，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液
，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。

① 机械分散法

特点:简便、快速,但对组织机械损伤大

，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织
。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)
，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状
，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液
，接种培养后

，细胞容易贴壁生长。

大鼠γ干扰素(IFN-γ)检测试剂盒 ，英文名
： IFN-γ ELISA Kit

Mouse ula sensitive C reactive protein (hs-CRP) ELISA Kit 小鼠超敏C反应蛋白(hs-CRP)检测试剂盒

ELISA 小鼠巨嗜细胞性蛋白-3β(mouse MIP-3β)  进口分装

CLIAKitforIL-18(HumanIerleukin18)ELISAKIT人白介素18

通用型李属坏死环斑病毒(PrunusNecroticRingspotVirus;PSV)试剂盒20次

ELISAKitGMP-140大鼠血浆α颗粒膜蛋白

SFRP1重组人 sFRP1 / SARP2 蛋白 Protein

纤溶酶原(Plg)重组蛋白 Recombinant Plasminogen (Plg)

TMED4重组人 TMED4 / ERS25 蛋白 (Fc 标签) Protein

CLK3 Protein Human 重组人 CLK3 蛋白 (GST 标签)

HA Protein H1N1 重组甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

纤溶酶原(Plg)重组蛋白 Recombinant Plasminogen (Plg)

CLK3 Protein Human 重组人 CLK3 蛋白 (GST 标签)

SFRP1重组人 sFRP1 / SARP2 蛋白 Protein

HA Protein H1N1 重组甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

TMED4重组人 TMED4 / ERS25 蛋白 (Fc 标签) Protein

小鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human Caenorhabditis elegans death gene (CED-3) ELISA Kit 人美丽线虫凋亡基因(CED-3)检测试剂盒

Humahrombusprecursorprotein,TpPELISAKit 人血栓前体蛋白(TpP)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

Elisa牛结核病抗体检测试剂盒2*96孔2*96孔

增强型HRP-DAB底物显色试剂盒10次

MouseCyclin-D1ELISAKit小鼠细胞周期素D1(Cyclin-D1)检测试剂盒规格：96T/48T

兔骨髓来源巨噬细胞小鼠上腺髓质素(ADM)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠上腺素能a1A受体(ADRA1A)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠上腺素(E)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠神经营养因子4(-4)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行

。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月

。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗
，非药用
，非食用