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        人食管癌成纤维细胞

        产品名称 :人食管癌成纤维细胞

        产品特点 :人食管癌成纤维细胞公司正在出售的产品NA Others H9N2 甲型流感 H9N2 (A/Chicken/Hong Kong/G9/97) 神经酶 (Neuraminidase / NA) 人细胞裂解液 KITLG Others Mouse 小鼠 SCF / C-kit ligand 杆状病毒-昆虫细胞裂解液

        产品型号:

        更新日期:2024-12-12

        访问次数:273

        人食管癌成纤维细胞的详细资料:

        人食管癌成纤维细胞

        实验报告:

        人食管癌成纤维细胞
        一、分离与培养 :

        1、无菌条件下 ,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织 ,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小;

        2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s ,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液 ,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;

        3 、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次 ,直至组织被消化;

        4 、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬 ,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养 ;

        5 、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;二、免疫荧光鉴定 :

        1 、待心房肌细胞生长至80%融合时 ,弃去培养基 ,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min ,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min ;

        2 、PBS冲洗细胞2次,每次10min ,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

        3 、PBS冲洗细胞2次 ,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min ;

        4 、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;

        5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;

        6、用PBS冲洗3次,每次10min ,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

        细胞简介 :

        人食管癌成纤维细胞

        人食管癌成纤维分离自食管癌组织;食管癌是常见的消化道肿瘤,每年约有30万人死于食管癌。其发病率和死亡率各国差异很大。我国是世界上食管癌高发地区之一 ,每年平均病死约15万人。男多于女,发病年龄多在40岁以上 。食管癌典型的症状为进行性咽下困难,先是难咽干的食物 ,继而是半流质食物 ,后水和唾液也不能咽下。成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动 ,在一定条件下 ,它可以实现跟纤维细胞的互相转化;成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的成纤维细胞呈圆形、折光性良好 ,悬浮于培养基中 。30min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足 ,表现为小的突起;6h后细胞基本贴壁,伸展成梭形 ,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密 ,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡 。细胞融合 ,并彼此连接成网状 ;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。

        产品名称

        人食管癌成纤维细胞

        组织来源

        食管癌

        英文名称

        Human Esophageal   Cancer Fibroblast Cells

        产品规格

        5×105cells/T25细胞培养瓶

         

        方法简介:

        人食管癌成纤维细胞

        实验室分离的人食管癌成纤维采用 - 胶原酶混合酶消化后差速贴壁制备而来 ,细胞总量约为5×10cells/瓶。

        质量检测

        实验室分离的人食管癌成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定 ,纯度可达90%以上 ,且不含有HIV-1 、HBV 、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

        培养信息 :

        人食管癌成纤维细胞

        培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin

        换液频率:每2-3天换液一次

        生长特性 :贴壁

        细胞形态:成纤维细胞样

        传代特性:可传5代左右 ;3代以内状态佳

        消化液:0.25%

        培养条件:气相:空气,95% ;CO2,5%

        人食管癌成纤维体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。

        人食管癌成纤维细胞

        注意事项 :

        人食管癌成纤维细胞
        1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象 ,若有上述现象发生请及时和242net必赢联系。

        2. 仔细阅读细胞说明书 ,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等,确保细胞培养条件一致 ,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由客户自行承担。

        3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片,是正常现象。观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

        4. 贴壁细胞可以消化,悬浮细胞直接混匀收集细胞 ,900 rpm-1000 rpm离心3 min,弃上清 。加5 mL PBS重悬细胞 ,再900 rpm-1000 rpm离心3 min ,,用新鲜的*培养基重悬细胞,并接种到新的培养瓶或培养皿中,置于培养箱中进行培养。

        5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

        6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因 ,个别敏感细胞会出现不稳定的情况 ,请及时和242net必赢联系,告知细胞的具体情况,以便242net必赢的技术人员跟踪回访直至问题解决。

        7. 该细胞仅供科研使用。

        8. 备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1 :2传代 。

        9.注意: 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿 。

        公司正在出售的产品:
        人食管癌成纤维细胞

        大鼠蛋白激酶抑制因子γ(PKIγ)检测试剂盒 ,英文名: PKIγ ELISA Kit

        L phenylalanine ammonia lyase (PAL) ELISA Kit L苯解氨酶(PAL)检测试剂盒

        RatIerleukin5,IL-5ELISAKIT 大鼠白介素5(IL-5)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

        CLIAKitforCyclin-D3ELISAKit大鼠细胞周期素D3

        细胞色素P450亚酶CYP2C19(CEC)活性荧光定量检测试剂盒20

        RatFibronectin,FNELISAKit大鼠纤连蛋白(FN)检测试剂盒规格:96T/48T

        DLL1重组大鼠 DLL1 / Delta-like Protein 1 蛋白 (Fc 标签) Protein

        CRF (Corticotropin-Releasing Factor 0.5mgCRF (Corticotropin-Releasing Factor) 促肾上腺皮质激素释放因子

        AGO3重组人 AGO3 / Argonaute 3 / EIF2C3 蛋白 Protein

        IL17RC Protein Human 重组人 IL17RC 蛋白 (aa 1-454, His 标签)

        EPOR Protein Mouse 重组小鼠 EPOR 蛋白

        CRF (Corticotropin-Releasing Factor 0.5mgCRF (Corticotropin-Releasing Factor) 促肾上腺皮质激素释放因子

        IL17RC Protein Human 重组人 IL17RC 蛋白 (aa 1-454, His 标签)

        DLL1重组大鼠 DLL1 / Delta-like Protein 1 蛋白 (Fc 标签) Protein

        EPOR Protein Mouse 重组小鼠 EPOR 蛋白

        AGO3重组人 AGO3 / Argonaute 3 / EIF2C3 蛋白 Protein

        豚鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA 试剂盒 96T/48T

        Human cytotoxin associated protein A (CagA) ELISA Kit 人细胞毒素相关蛋白A(CagA)检测试剂盒

        Humanai-cardiolipinaibodyIgM,ACA-IgMELISAKit 人抗心0脂抗体IgM(ACA-IgM)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

        Humancaneouslymphocyte-associatedaigen,CLA检测试剂盒人皮肤淋巴细胞相关抗原(CLA)检测试剂盒规格:96T/48T

        组织EPHB3激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20

        humanprogestinandadipoQreceptorfamilymember,PAQR7ELISAKit人孕同和adipoQ受体家族成员Ⅶ(PAQR7)检测试剂盒规格:96T/48T

        人食管癌成纤维细胞(羟甲基)基盐酸盐   100g

        is,Hydrochloride   500g

        曲拉通X-100   100ml

        itonX-100   250ml


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