242net必赢

细胞简介：

大鼠主动脉平滑肌分离自主动脉组织；主动脉是体循环的动脉主干

。其运行路径为：升主动脉起于左心室，至右侧第2胸肋关节高度移行为主动脉弓
，弓行向左后至第4胸椎体下缘移行为降主动脉；在第12胸椎体高度穿膈的主动脉裂孔移行为腹主动脉，以上为胸主动脉，至第4腰椎体下缘分为左、右髂总动脉；髂总动脉在骶髂关节高度分为髂内
、外动脉
。主动脉平滑肌细胞原代分离培养3天后

，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长
，高低起伏；细胞密度低时
，常交织成网状

；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状
。传代后细胞生长较快
，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点
。主动脉平滑肌细胞在心血管疾病发生、发展中具有重要作用，以主动脉平滑肌细胞为实验研究对象
，探讨心血管疾病相关发病机制是目前研究的热点；体外培养的主动脉平滑肌细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义
。

方法简介
：

公司实验室分离的大鼠主动脉平滑肌采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的大鼠主动脉平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1
、HBV
、HCV
、支原体、细菌、酵母和真菌等
。

培养信息：

培养基 含FBS
、生长添加剂

、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳

消化液 0.25%

培养条件 气相
：空气，95%
；CO2
，5%

实验报告：

一、分离与培养：

1
、无菌条件下
，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织
，然后用PBS将此组织块清洗2次
，将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s
，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液
，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s
，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置
，重复此步骤2-3次
，直至组织被消化
；

4
、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液

，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二

、免疫荧光鉴定：

1

、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次
，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2
、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下
，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3
、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下
，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗
，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min

，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗
， 37℃条件下放置1h
；

6
、用PBS冲洗3次
，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

公司正在出售的产品：

小鼠单核细胞趋化蛋白4试剂盒   小鼠单核细胞趋化蛋白4试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠单核细胞趋化蛋白4试剂盒

，规格型号
：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装）
，产品别名
：小鼠单核细胞趋化蛋白4试剂盒、小鼠单核细胞趋化蛋白4eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期
：6个月。

小鼠酯转移蛋白试剂盒   小鼠酯转移蛋白试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠酯转移蛋白试剂盒，规格型号

：96T/48T
，来源
：试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠酯转移蛋白试剂盒、小鼠酯转移蛋白eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期
：6个月。

小鼠胆囊收缩素试剂盒   小鼠胆囊收缩素试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠胆囊收缩素试剂盒

，规格型号：96T/48T，来源
：试剂盒（进口分装）
，产品别名：小鼠胆囊收缩素试剂盒、小鼠胆囊收缩素eisa试剂盒   保存条件
：2-8℃   保质期：6个月。

小鼠二肽基肽酶试剂盒   小鼠二肽基肽酶试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠二肽基肽酶试剂盒，规格型号
：96T/48T
，来源：试剂盒（进口分装），产品别名
：小鼠二肽基肽酶试剂盒
、小鼠二肽基肽酶eisa试剂盒   保存条件

：2-8℃   保质期：6个月。

小鼠胶原酶II(Collagenase II)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat ai endomeial aibody (EMAb) ELISA Kit 大鼠抗子宫内膜抗体(EMAb)试剂盒

HumanIg-likeanscriptsReceptor,ILTsRELISAKit 样转录体受体(ILTsR/LIR/CD85)试剂盒 96T/48T 进口分装

Humanai-cyclicciullinatedpeptide,CCP试剂盒人抗环胍肽抗体(CCP)试剂盒规格：96T/48T

植物活性线粒体分离试剂盒10次

Humanα1-microglobulin,α1-MGELISAKit人α1微球蛋白(α1-MG)试剂盒规格
：96T/48T

CXCL13重组狗 CXCL13 / BCA-1 蛋白 Protein

N-ras 原癌基因抗原 0.5mgN-ras 原癌基因抗原

NTRK1重组人 TrkA / NTRK1 蛋白 (aa 194-413, His 标签) Protein

EGFL6 Protein Human 重组人 EGFL6 / EGF-L6 蛋白

FAM3D Protein Mouse 重组小鼠 FAM3D / Oit1 蛋白 (Fc 标签)

N-ras 原癌基因抗原 0.5mgN-ras 原癌基因抗原

EGFL6 Protein Human 重组人 EGFL6 / EGF-L6 蛋白

CXCL13重组狗 CXCL13 / BCA-1 蛋白 Protein

FAM3D Protein Mouse 重组小鼠 FAM3D / Oit1 蛋白 (Fc 标签)

NTRK1重组人 TrkA / NTRK1 蛋白 (aa 194-413, His 标签) Protein

大鼠主动脉平滑肌细胞大鼠粘蛋白1(MUC1)试剂盒

，英文名： MUC1 ELISA Kit

Mouse lymphocyte function associated aigen 3 (LFA-3/CD58) ELISA Kit 小鼠淋巴细胞功能相关抗原3(LFA-3/CD58)试剂盒

MouseIerleukin1α,IL-1αELISAkit 小鼠白介素1α(IL-1α)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHumanghcagons-likepepfide1,GLP-1ELISAKit人胰高血糖素样肽1

吸烟者人体肺组织S9组分(5毫克/毫升)500微升

ELISAKitSDF-1β/CXCL12大鼠基质细胞衍生因子1β

注意事项
：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象
，若有上述现象发生请及时和242net必赢联系
。

2. 仔细阅读细胞说明书
，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基
、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题
，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态
。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片
，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h
。

4. 贴壁细胞可以消化

，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清
。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，

，用新鲜的*培养基重悬细胞

，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和242net必赢联系

，告知细胞的具体情况

，以便242net必赢的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞

，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1：2传代 
。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿
。不是1个T25瓶传2个10cm皿
。