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细胞简介
：

大鼠脾淋巴分离自脾脏组织；脾脏是机体大的免疫器官
，占全身淋巴组织总量的25%
，含有大量的淋巴细胞和巨噬细胞，是机体细胞免疫和体液免疫的中心。位于左季肋区后外方肋弓深处
，与9－11肋相对
，长轴与第10肋一致
。膈面与膈肌和左肋膈窦相邻，前方有胃，后方与左肾
、左肾上腺毗邻，下端与结肠脾沟相邻，地柔软的网状内皮细胞器官。淋巴细胞（lymphocyte）白细胞的一种，由淋巴器官产生

，机体免疫应答功能的重要细胞成分。淋巴器官根据其发生和功能的差异，可分为中枢淋巴器官（又名初级淋巴器官）和周围淋巴器官（又名次级淋巴器官）两类。前者包括、腔上囊或其相当器官（有人认为在哺乳动物是骨髓）。它们无须抗原刺激即可不断增殖淋巴细胞，成熟后将其转送至周围淋巴器官
。后者包括脾
、淋巴结等。成熟淋巴细胞需依赖抗原刺激而分化增殖，继而发挥其免疫功能。

方法简介：

见说明

质量检测

本公司生产的大鼠脾淋巴采用机械研磨法结合密度梯度离心法制备而来，细胞总量约为1×10^6cells/瓶
；细胞纯度可达95%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV

、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

RPMI-1640、FBS


、淋巴细胞生长添加剂
、Penicillin、Streptomycin等

实验报告：

一、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次
，将组织剪成1mm3左右大小
；

2
、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶）
，混悬10s

，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置
；

3
、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次
，直至组织被消化
；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液
，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬
，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养
；

5、差速贴壁1h后
，吸出培养基
，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二
、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次
，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min
；

2
、PBS冲洗细胞2次
，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次
，每次10min
，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗


，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次
，每次10min
，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照
。

公司正在出售的产品：

人重去甲上腺素(NE-B)试剂盒   96T/48T

人血管生长因子(TAF)试剂盒   96T/48T

人相关抗原(TAA)试剂盒   96T/48T

人特异性抗原(TSA)试剂盒   96T/48T

豚鼠促肾上腺皮质激素(ACTH)试剂盒 ，英文名： ACTH ELISA Kit

Many people immunoglobulin receptor (poly-IgR) ELISA Kit 人多免疫球蛋白受体(poly-IgR)试剂盒

rabbitN-terminalprocollagenⅢpropeptide,PⅢNPELISAKit 兔子Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforBeta-HexA(MouseBeta-hexosaminidaseA)ELISAKit小鼠β氨基己糖苷酶A

细菌细胞色素氧化酶活性比色法定量试剂盒20次

rabbitHyaluronicacid,HAELISAKit兔子透明质酸(HA)试剂盒规格
：96T/48T

FZD5重组人 Frizzled-5 / FZD5 蛋白 (His & Fc 标签) Protein

神经生长因子(NGF)重组蛋白 Recombinant Nerve Growth Factor (NGF)

TRIP10重组人 TRIP10 / Cip4 蛋白 Protein

IL3RA Protein Human 重组人 IL3RA / CD123 蛋白

HA Protein Influenza 重组甲型流感 H1N1 (A/Ohio/07/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

神经生长因子(NGF)重组蛋白 Recombinant Nerve Growth Factor (NGF)

IL3RA Protein Human 重组人 IL3RA / CD123 蛋白

FZD5重组人 Frizzled-5 / FZD5 蛋白 (His & Fc 标签) Protein

HA Protein Influenza 重组甲型流感 H1N1 (A/Ohio/07/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

TRIP10重组人 TRIP10 / Cip4 蛋白 Protein

大鼠脾淋巴细胞猪肝细胞生长因子(HGF)ELISA 试剂盒

Human Ureaplasma urealyticum aibody (UU-Ab) ELISA Kit 人解脲脲原体抗体(UU-Ab)试剂盒

PorcineEndothelialniicoxidesyhase3,eNOS-3ELISAKit 猪内皮型合成酶3(eNOS-3)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforAlpha-bungarotoxin,Alpha-BGTELISAKitα-银环蛇毒素

血液赖(lysine)含量化学比色法定量试剂盒20次

NudeMouseProteinPhosphatase,PPELISAKit裸鼠蛋酸酶(PP)试剂盒规格：96T/48T

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好
，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和242net必赢联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态
、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片
，是正常现象
。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h
。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞
，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清
。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min
，，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中
，置于培养箱中进行培养
。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养
。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因
，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和242net必赢联系

，告知细胞的具体情况，以便242net必赢的技术人员跟踪回访直至问题解决
。

7. 该细胞仅供科研使用
。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞
，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞
。收到细胞后次传代建议1
：2传代 
。

9.注意
： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿
。不是1个T25瓶传2个10cm皿。