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细胞简介：

骨的微循环系统是骨微环境的重要组成部分，是骨内物质交换
，向骨及骨内其它细胞运送养料和排除废物的主要场所
。通常，微循环血流能满足骨内各种组织代谢需要，使骨内各种细胞功能得以正常进行。

骨微血管内皮细胞构成了骨内微血管的内衬，其不仅仅是血管与周围组织之间的屏障
，也与其它器官微血管内皮细胞一样，对局部骨组织代谢具有重要的调控作用，参与了许多骨的病理生理过程
，再骨吸收、新骨的形成、血管再生
、营养物质转运
、骨内代谢产物输出及维持骨内微环境平衡方面具有重要作用
。

细胞特性：

1）细胞来源于人正常骨组织。

2）细胞鉴定：血管假性血友病因子（vWF）荧光染色为阳性。

3）经鉴定细胞纯度高于90%。

4）不含有 HIV-1
、 HBV、HCV
、支原体、、酵母和
。

5）细胞生长方式：上皮样

，多角形细胞，贴壁培养。

推荐培养基
：

242net必赢推荐使用 delf原代 内皮 细胞培养体系 作为该细胞的培养基。

实验报告：

一、分离与培养：

1
、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小
；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min
，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清

，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s
，置37℃消化10 min后
，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次
，直至组织被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液
，1200r/min 离心10min，弃去上清
，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬
，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养
；

5
、差速贴壁1h后
，吸出培养基
，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二
、免疫荧光鉴定
：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2
、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3
、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗
，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1

：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次
，每次10min
，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照
。

公司正在出售的产品：

大鼠分泌型卷曲相关蛋白4(SFRP4)检测试剂盒 ，英文名： SFRP4 ELISA Kit

Rat betacellulin (BTC) ELISA Kit 大鼠β细胞素(BTC)检测试剂盒

Ratansforminggrowthfactorα,TGF-αELISAKit 大鼠转化生长因子α(TGF-α)检测试剂盒 进口分装

CLIAKitforDPPIVELISAKit大鼠二肽基肽酶Ⅳ

细胞葡萄糖激酶(glucosekinase)比色法定量检测试剂盒20次

Rathepaticlipase,HLELISAKit大鼠肝脂酶(HL)检测试剂盒

IL1A重组人 IL-1 alpha / IL1A / IL1F1 蛋白 Protein

松弛肽(RLN)重组蛋白 Recombinant Relaxin (RLN)

NCAM2重组人 NCAM2 / Neural cell adhesion molecule 2 蛋白 (His 标签) Protein

ACBD6 Protein Human 重组人 ACBD6 蛋白 (His 标签)

HA Protein H5N1 重组甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/R0405050/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 标签)

松弛肽(RLN)重组蛋白 Recombinant Relaxin (RLN)

ACBD6 Protein Human 重组人 ACBD6 蛋白 (His 标签)

IL1A重组人 IL-1 alpha / IL1A / IL1F1 蛋白 Protein

HA Protein H5N1 重组甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/R0405050/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 标签)

NCAM2重组人 NCAM2 / Neural cell adhesion molecule 2 蛋白 (His 标签) Protein

植物(ETH)ELISA 试剂盒

Human ai parainfluenza virus IgM aibody (ai-PIV IgM) ELISA Kit 人抗副流感病毒IgM抗体(ai-PIV IgM)检测试剂盒

PorcineImmunoglobulinG,IgGELISAKit 猪免疫球蛋白G(IgG)检测试剂盒 进口分装

CLIAKitforAFUELISAKit大鼠αL岩藻糖苷酶

血液唾液酸(SA)比色法定量检测试剂盒50次

MouseThyroid-Peroxidase,TPOELISAKit小鼠甲状腺过氧化物酶(TPO)检测试剂盒

人骨微血管内皮细胞匀浆制作或抽提   Homogenate production or exaction

（皮肤骨骼肌肠肌肉等难匀特殊样品）   (the skin and skeletal muscle and other hard uniform special sample)

超氧化物歧化酶（SOD）检测   Superoxide dismase (SOD) detection

二（MDA）检测   Malondialdehyde (MDA) detection

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液
、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和242net必赢联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息
，如细胞形态、所用培养基、血清比例
、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致
，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面
，显微镜下观察细胞状态

。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min
，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，
，用新鲜的*培养基重悬细胞
，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养
。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态
，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和242net必赢联系，告知细胞的具体情况，以便242net必赢的技术人员跟踪回访直至问题解决
。

7. 该细胞仅供科研使用

。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞
，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1
：2传代 。

9.注意
： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿
。不是1个T25瓶传2个10cm皿。