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细胞简介：

毛囊是包围在毛发根部的囊状组织
，内层是上皮组织性毛囊，外层是结缔组织性毛囊
，内层与表皮相连，外层则与真皮相连。

毛囊作为一种重要的皮肤附属器官，为显著的特点是始终处于生长期
、退行期和休止期的周期性循环中。在毛囊的形态学和周期性循环中，毛囊的角质细胞作为一种特殊类型的角质形成细胞，受毛细胞分泌的一些细胞因子或信号因子等作用
，迅速发生分化增殖或凋亡，进而诱导毛囊进入生长期或退行期。

细胞特性：

1）细胞来源于人头皮组织。

2)细胞鉴定：广谱角蛋白((PCK)荧光染色为阳性
。

3)经鉴定细胞纯度高于90%
。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。

5)细胞生长方式
：上皮样细胞

，贴壁培养
。

推荐培养基
：

242net必赢推荐使用 delf 原代 角质形成 细胞培养体系 作为体外培养原代肠微血管内皮细胞的培养基。

实验报告
：

一、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；

2
、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶）

，混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清
，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液
，混悬10s
，置37℃消化10 min后
，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次
，直至组织被消化；

4
、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二、免疫荧光鉴定：

1
、待心房肌细胞生长至80%融合时
，弃去培养基
，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min
；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下
，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min

，然后在室温条件下
，用4% BSA封闭细胞30min；

4
、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜

；

5
、PBS冲洗细胞3次，每次10min
，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗
， 37℃条件下放置1h

；

6、用PBS冲洗3次
，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照

。

公司正在出售的产品
：

P-PKCELISAKit

大鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)elisa分析检测试剂盒

NAG ELISA Kit

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BALPELISAKit

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ATP合酶亚基O抗体

OSCP

CDK5和ABL1酶底物1抗体

CABLES1

DNA拓普西异构酶Ⅱ抗体  Anti-TOPO II/TOPO II Alpha

配对盒基因7抗体  Anti-PAX7

肝磷酸酯酶1抗体  Anti-PRL1/PTP4A1

丝/精相关核基质蛋白2抗体  Anti-SRRM2

辣根过氧化物酶标记的小鼠抗羊IgG H&L

鱼促甲状腺素(TSH)elisa生化检测试剂盒

TSH ELISA Kit

人丙酰A羧化酶β多肽(PCCB)elisa生化检测试剂盒

人毛囊角质细胞HumanPCCBELISAKit

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液
、浑浊等现象
，若有上述现象发生请及时和242net必赢联系。

2. 仔细阅读细胞说明书
，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等
，确保细胞培养条件一致
，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担

。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面

，显微镜下观察细胞状态。因运输问题
，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后
，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清

。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养
。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片
，记录细胞状态
，便于和我司技术部沟通交流

。由于运输的原因
，个别敏感细胞会出现不稳定的情况
，请及时和242net必赢联系，告知细胞的具体情况，以便242net必赢的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用
。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞
，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞
。收到细胞后次传代建议1

：2传代 
。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿。