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细胞简介

：

肾是脊椎动物的一种器官
，属于泌尿系统的一部分，负责过滤血液中的杂质、维持体液和电解质的平衡，后产生尿液经尿道排出体外；同时也具备的功能以调节血压。

周细胞是一种包围全身和静脉中内皮细胞的细胞，可以收缩。周细胞产生手指状的外延以调控的血流量。周细胞和内皮细胞之间共同拥有一个基膜，基膜上有多种细胞连接，包括多种整合素、神经钙黏素
、纤连蛋白以及接合。

细胞特性：

1）组织来源于实验动物的正常肾组织
。

2)细胞鉴定：平滑肌肌动蛋白（α-SMA）荧光染色为阳性。

3)经鉴定细胞纯度高于90%
。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和
。

5)细胞生长方式
：长梭形细胞
，不规则细胞，贴壁培养。

推荐培养基
：

242net必赢推荐使用 DELF 原代 周 细 胞培养体系 作为体外培养的培养基。

实验报告：

一
、分离与培养
：

1、无菌条件下
，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次
，将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min
，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后
，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织被消化；

4

、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液
，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬
，接种于25cm2培养瓶
，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养
；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养
；二、免疫荧光鉴定
：

1
、待心房肌细胞生长至80%融合时
，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min
，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min
；

2
、PBS冲洗细胞2次，每次10min
，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗

， 37℃条件下放置1h；

6
、用PBS冲洗3次，每次10min
，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好
，培养液是否有漏液、浑浊等现象
，若有上述现象发生请及时和242net必赢联系。

2. 仔细阅读细胞说明书
，了解细胞相关信息
，如细胞形态
、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等
，确保细胞培养条件一致
，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题

，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态
。因运输问题
，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象
。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化
，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，，用新鲜的*培养基重悬细胞
，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养

。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养

。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片
，记录细胞状态
，便于和我司技术部沟通交流

。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和242net必赢联系
，告知细胞的具体情况，以便242net必赢的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用
。

8. 备注
：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1
：2传代 。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿。

公司正在出售的产品：

CNTFELISAKit

大鼠Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNT)elisa分析检测试剂盒

PⅢNT ELISA Kit

人钙依赖性胞浆型磷脂酶A2(iPLA2)elisa分析检测试剂盒

HumaniPLA2ELISAkit

细胞环氧化酶（CYCLOOXYGENASE-1/2）总活性荧光定量检测试剂盒

人TAR DNA结合蛋白43(TARDBP/TDP43)elisa检测试剂盒

大鼠白介素10(IL10)elisa检测试剂盒

小鼠髓细胞触发受体2(TREM2)elisa检测试剂盒

GSK3β相互作用蛋白抗体

HSPC210/GSK3beta interaction protein

乳腺癌相关蛋白2抗体

BCAS2

山羊Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)elisa检测试剂盒

待测样品处理试剂盒

胚胎干细胞补充培养基

大鼠乙酰酯酶(AChE)elisa检测试剂盒

果胶酶抑制蛋白18抗体

Pectinesterase inhibitor 18

源盒蛋白B7抗体

HOXB7

翻译控制肿瘤蛋白抗体  Anti-TCTP

凋亡相关蛋白7抗体  Anti-PDCD7

PDZ结构域PDZK8蛋白抗体  Anti-PDZD8

5-羟色胺受体3C抗体  Anti-5HT3C/5HT3E

罗丹明标记的羊抗鸡IgG H&L

大鼠Ghrelin受体(Ghsr)elisa生化检测试剂盒

Ghsr ELISA kit

人谷脱羧酶自身抗体IgM(GAD-Ab-IgM)elisa生化检测试剂盒

兔肾周细胞humanGAD-Ab-IgMELISAKit