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细胞简介
：

结膜为一层薄而透明的粘膜组织
，覆盖在眼睑后面和眼球前面

，分睑结膜、球结膜、穹窿部结膜
。由结膜形成的囊状间隙分为结膜囊。

细胞特性：

1）组织来源于实验动物的眼球
。

2)细胞鉴定
：结蛋白（Desmin）或波形蛋白（Vimentin）荧光染色为阳性。
。

3)经鉴定细胞纯度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、
、酵母和。

5)细胞生长方式：长梭形细胞
，不规则细胞，贴壁培养。

推荐培养基
：

242net必赢推荐使用 Delf原代成纤维细胞培养体系 作为体外培养的培养基

。

实验报告
：

一、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次
，将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清
，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置
；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后
，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织被消化；

4
、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液
，1200r/min 离心10min

，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶
，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养
；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养
；二、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min
；

2

、PBS冲洗细胞2次
，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min
；

3

、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4
、按1: 100的比例稀释α-actin一抗
，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min
，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6
、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照
。

公司正在出售的产品
：

大鼠胱天蛋白酶7(CASP7)检测试剂盒 
，英文名： CASP7 ELISA Kit

Rabbit ansforming growth factor beta 2 (TGF beta 2) ELISA Kit 兔转化生长因子β2(TGFβ2)检测试剂盒

(OC43/HKU1)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T

CLIAKitforMMP-3(HumanMaixmetalloproteinase3)ELISAkit人基质金属蛋白酶3

体液基质金属蛋白酶(MMP-14)活性荧光定量检测试剂盒20次(10样本)

ELISAKiBP犬醇结合蛋白

CADM3重组大鼠 CADM3 / NECL1 / IGSF4B 蛋白  Protein

CULLIN (Cdc53/CUL 0.5mgCULLIN (Cdc53/CUL)

NUDT2重组人 NUDT2 / Ap4A hydrolase 蛋白 (His 标签) Protein

ANXA6 Protein Human 重组人 Annexin VI / ANXA6 蛋白 (His 标签)

ACVR2B Protein Mouse 重组小鼠 ACTRIIB / ACVR2B 蛋白 (His 标签)

CULLIN (Cdc53/CUL 0.5mgCULLIN (Cdc53/CUL)

ANXA6 Protein Human 重组人 Annexin VI / ANXA6 蛋白 (His 标签)

CADM3重组大鼠 CADM3 / NECL1 / IGSF4B 蛋白  Protein

ACVR2B Protein Mouse 重组小鼠 ACTRIIB / ACVR2B 蛋白 (His 标签)

NUDT2重组人 NUDT2 / Ap4A hydrolase 蛋白 (His 标签) Protein

猪基质金属蛋白酶9(MMP-9)ELISA 试剂盒

Human collectin (Collectin) ELISA Kit 人胶原凝集素(Collectin)检测试剂盒

PorcinePulmonarysurfatca-associatedproteinA,SP-AELISAKit 猪肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)检测试剂盒 进口分装

CLIAKitforAlpha-SCA(HumanAlpha-sarcomericactin)ELISAKit人α横纹肌肌动蛋白

血液甲戊二羟酸激酶(mevalsonatekinase)活性比色法定量检测试剂盒20次

Plaphosphatidicacid,PAELISAKit植物凝脂酸(PA)检测试剂盒

小鼠结膜囊成纤维细胞猪凋亡相关因子检测试剂盒   猪凋亡相关因子试剂盒   规格型号：96T/48T   猪凋亡相关因子试剂盒

，规格型号
：96T/48T
，来源：检测试剂盒（进口分装）

，产品别名：猪凋亡相关因子试剂盒

、猪凋亡相关因子eisa试剂盒   保存条件
：2-8℃   保质期：6个月
。

猪检测试剂盒   猪试剂盒   规格型号：96T/48T   猪试剂盒，规格型号
：96T/48T
，来源：检测试剂盒（进口分装），产品别名
：猪试剂盒、猪eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月
。

猪胆囊收缩素检测试剂盒   猪胆囊收缩素试剂盒   规格型号
：96T/48T   猪胆囊收缩素试剂盒
，规格型号：96T/48T，来源
：检测试剂盒（进口分装）

，产品别名：猪胆囊收缩素试剂盒、猪胆囊收缩素eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

猪单核细胞增多性李斯特菌素O检测试剂盒   猪单核细胞增多性李斯特菌素O试剂盒   规格型号
：96T/48T   猪单核细胞增多性李斯特菌素O试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：检测试剂盒（进口分装），产品别名

：猪单核细胞增多性李斯特菌素O试剂盒、猪单核细胞增多性李斯特菌素Oeisa试剂盒   保存条件
：2-8℃   保质期
：6个月
。

注意事项
：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和242net必赢联系

。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息
，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等
，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题
，责任由客户自行承担

。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面
，显微镜下观察细胞状态。因运输问题
，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片
，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化
，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min
，弃上清
。加5 mL PBS重悬细胞
，再900 rpm-1000 rpm离心3 min
，，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养
。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况
，请及时和242net必赢联系，告知细胞的具体情况
，以便242net必赢的技术人员跟踪回访直至问题解决
。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注
：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞

，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞
。收到细胞后次传代建议1：2传代
。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿。