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        GS elisa 试剂盒四大验条件
        点击次数:865 更新时间 :2017-04-25
           GS elisa 试剂盒四大验条件
          在GS elisa 试剂盒实验中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
          (1) 固相载体的选择 :许多物质可作为固相载体 ,如聚氯乙烯 、聚苯乙烯 、聚丙酰胺和纤维素等 。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选 :用等量抗原包被 ,在同一GS elisa 试剂盒实验条件下进行反应 ,观察其显色反应是否均一性 ,据此判明其吸附性能是否良好。
          (2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。GS elisa 试剂盒吸附温度 ,时间及其蛋白量也 有一定影响,一般多采用4℃ 18~24小时 。蛋白质包被的zui适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳 性标本的OD值。选择OD值zui大而蛋白量zui少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml 。
          (3) 酶标记抗体工作浓度的选择 :首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物 、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
          (4)  GS elisa 试剂盒酶的底物及供氢体的选择 :对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色 。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有 条件者应使用不致癌 、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应 。通常GS elisa 试剂盒底物作用时间 ,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制 ,尤其是H2O2在临用前加入。
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