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        普通变形杆菌探针法荧光定量PCR检测试剂盒RNA质量检测
        点击次数 :800 更新时间:2021-05-20

        RNA质量检测:
        1)紫外吸收法测定
        先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零 。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度 。
        浓度测定
        A260下读值为1表示40 g RNA/ml。样品RNA浓度(g/ml)计算公式为:A260 ×稀释倍数× 40 g/ml。具体计算如下 :
        RNA溶于40 l DEPC水中,取5ul,1:100稀释至495的TE中,测得A260 = 0.21
        RNA 浓度= 0.21 ×100 ×40 g/ml = 840 g/ml 或 0.84 g
        取5ul用来测量以后,剩余样品RNA为35 l,剩余RNA总量为 :
        35 l × 0.84 gl = 29.4 g
        ②纯度检测
        RNA溶液的A260/A280的比值即为RNA纯度,比值范围1.8到2.1。
        2)变性琼脂糖凝胶电泳测定
        ①制胶
        1g琼脂糖溶于72ml水中,冷却至60℃,10 ml的10× MOPS电泳缓冲液和18 ml的37% (12.3 M)。
        10×MOPS电泳缓冲液
        浓度 成分
        0.4M MOPS ,pH 7.0
        0.1M 乙酸钠
        0.01M EDTA
        灌制凝胶板 ,预留加样孔至少可以加入25 l溶液。胶凝后取下梳子,将凝胶板放入电泳槽内 ,加足量的1×MOPS电泳缓冲液至覆盖胶面几个毫米 。

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