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小鼠甲基化DNA（MDNA ）酶联免疫操作步骤
点击次数：1126 更新时间：2020-01-08
操作步骤
1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支 ，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释 。2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同） 、标准孔 、待测样品孔 。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl ，然后再加待测样品10μl（样品稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟 。
4.配液 ：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体 ，甩干，每孔加满洗涤液 ，静置30秒后弃去 ，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl ，空白孔除外。
7.温育：操作同3 。
8.洗涤：操作同5。
9.显色 ：每孔先加入显色剂A50μl ，再加入显色剂B50μl ，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.
10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色） 。
11.测定：以空白空调零 ，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行 。