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        ELISA试剂盒SCI文章操作流程及实验条件
        点击次数:1320 更新时间 :2019-09-18

        实验条件
        固相载体 :可作为固相载体的物质很多 ,如 :纤维素、聚丙烯酰胺 、聚苯乙烯、聚丙烯、交联葡聚糖、玻璃、硅橡胶、琼脂糖凝胶等 。可以各种形式出现;试管、微量反应板凹孔、小珠..... 。zui常用的是聚苯乙烯制品,其吸附性。固相包被的机制一般不外乎物理吸附和共价交联,
        封闭:以无关蛋白占据载体上未被包被的空隙 ,常用的封闭液是1%牛血清白蛋白或10%小牛血清。
        待测样品:稀释度要合适,浓度太大会发生非特异性吸附造成假阳性 ,过分稀释会影响抗原-抗体之间的免疫学反应 。选择zui适稀释度 ,在实验体系中取光密度在1.0左右的稀释度为宜。
        酶结合物 :使用高质量的酶结合物是elisa成功的关键。
        ELISA试剂盒SCI文章注意事项
        酶联免疫技术的试剂标准化问题尚未完* ,温育过程的时间、温度、洗涤液的种类及洗涤次数都是影响zui后测定的因素。为使实验得到满意的结果 ,在操作过程中应作到
        1、每次试验都必须设阳性和阴性对照。
        2、封闭要*。
        3、洗涤要测定。

        ELISA试剂盒SCI文章操作流程:
        检测抗体多用间接型elisa。以纯化抗原包被载体 ,经4℃ ,以无关蛋白封闭至少2小时以上,加入待测样品 ,室温孵育1小时 ,洗涤干净后加酶标抗体 ,再经室温孵育、洗涤后,以底物显色 ,显色到一定程度终止反应,在酶标仪上读结果或以肉眼判断 。
        类型:elisa具体方法的类型繁多,试剂的标准化问题还未zui后解决 ,温育的时间、温度、洗涤液的种类及洗涤次数等都是影响测定的因素。但参考以上基本过程,无论怎样变化 ,均离不开抗原-抗体反应、酶标抗体的免疫学反应及酶催化作用。
        特点:
        1、敏感性高,可检出浓度在ug~mg/ml水平 ;
        2、特异性强;
        3、重复性好;
        4 、快速、简便、廉价。

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