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        ELISA试剂盒SCI文章操作流程及实验条件
        点击次数:1176 更新时间:2019-09-18

        实验条件
        固相载体:可作为固相载体的物质很多,如 :纤维素、聚丙烯酰胺、聚苯乙烯、聚丙烯、交联葡聚糖、玻璃 、硅橡胶、琼脂糖凝胶等。可以各种形式出现;试管 、微量反应板凹孔、小珠..... 。zui常用的是聚苯乙烯制品,其吸附性 。固相包被的机制一般不外乎物理吸附和共价交联,
        封闭:以无关蛋白占据载体上未被包被的空隙 ,常用的封闭液是1%牛血清白蛋白或10%小牛血清。
        待测样品 :稀释度要合适,浓度太大会发生非特异性吸附造成假阳性,过分稀释会影响抗原-抗体之间的免疫学反应 。选择zui适稀释度,在实验体系中取光密度在1.0左右的稀释度为宜 。
        酶结合物:使用高质量的酶结合物是elisa成功的关键。
        ELISA试剂盒SCI文章注意事项
        酶联免疫技术的试剂标准化问题尚未完* ,温育过程的时间、温度、洗涤液的种类及洗涤次数都是影响zui后测定的因素 。为使实验得到满意的结果 ,在操作过程中应作到
        1 、每次试验都必须设阳性和阴性对照 。
        2、封闭要*。
        3 、洗涤要测定 。

        ELISA试剂盒SCI文章操作流程:
        检测抗体多用间接型elisa。以纯化抗原包被载体,经4℃ ,以无关蛋白封闭至少2小时以上,加入待测样品 ,室温孵育1小时,洗涤干净后加酶标抗体 ,再经室温孵育、洗涤后,以底物显色 ,显色到一定程度终止反应 ,在酶标仪上读结果或以肉眼判断。
        类型 :elisa具体方法的类型繁多,试剂的标准化问题还未zui后解决,温育的时间 、温度 、洗涤液的种类及洗涤次数等都是影响测定的因素。但参考以上基本过程 ,无论怎样变化,均离不开抗原-抗体反应、酶标抗体的免疫学反应及酶催化作用。
        特点 :
        1 、敏感性高,可检出浓度在ug~mg/ml水平;
        2、特异性强 ;
        3 、重复性好 ;
        4、快速、简便、廉价。

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