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肾母细胞瘤蛋白重组兔单抗操作注意事项
点击次数：88 更新时间 ：2025-07-17
在操作肾母细胞瘤蛋白重组兔单抗时 ，需严格遵守以下注意事项以确保实验的准确性和安全性：
1. 抗体保存与解冻
- 长期保存应置于-20℃或-80℃，避免反复冻融导致抗体效价降低 。解冻时需在4℃缓慢溶解 ，或置于冰上短时解冻 ，严禁高温快速解冻 。
- 分装后的小剂量抗体可减少重复冻融次数，使用前短暂离心以集中液体 。
2. 实验环境控制
- 操作区域需保持清洁，避免交叉污染 。建议在超净台或生物安全柜中进行稀释和分装 。
- 若需长期保存工作液，可加入0.02%叠氮钠（注意毒性） ，但避免用于活细胞实验 。
3. 样本处理与抗体稀释
- 组织或细胞样本需充分固定或裂解，确保抗原暴露 。建议通过预实验优化抗体稀释比例（如1:100至1:1000），避免高浓度导致的非特异性结合。
- 使用含1% BSA或5%脱脂奶粉的PBS作为封闭液，减少背景信号 。
4. 对照设置与结果验证
- 必须设立阴性对照（如不加一抗）和阳性对照（已知表达靶蛋白的样本），以排除假阳性或假阴性结果。
- 若结果异常，需检查抗体有效期 、存储条件及实验步骤（如封闭时间 、洗涤次数等） 。
5. 废弃物处理
- 实验后的抗体溶液及接触材料需按生物危害废弃物处理 ，避免直接排放或随意丢弃 。
通过规范操作和细节把控，可显著提升实验的重复性与可靠性，为后续研究提供扎实的数据基础。