细胞处理：
1、复苏细胞 ：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离4分钟，弃去上清液 ，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度 。
2 、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养 。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清 ，用不含钙 、镁离子的PBS润洗细胞1-2次 。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落 ，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化 。
3)按6-8ml/瓶补加培养基 ，轻轻打匀后吸出 ，在1000RPM条件下离4分钟 ，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀 。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中 。
接下来 ，细胞在新的培养环境中继续生长，需要密切关注其状态 。每天定时观察细胞形态、密度以及培养基的颜色变化，确保无细菌或霉菌污染。若培养基因细胞代谢而变黄，应及时更换新鲜培养基，以维持良好的生长环境。
在细胞培养过程中 ，温度 、湿度及CO₂浓度的控制至关重要 。通常，哺乳动物细胞培养在37℃、5% CO₂及饱和湿度的条件下进行 ，这样的条件能够模拟体内环境，促进细胞增殖 。定期检查培养箱的性能参数，确保它们处于最佳状态，是细胞培养成功的关键。
此外 ，细胞的健康状态还需通过细胞活力检测来评估。常用的方法包括台盼蓝染色法，通过染色区分活细胞与死细胞，从而计算出细胞活力百分比。保持高细胞活力对于后续实验，如细胞转染 、细胞分化研究或药物筛选等，都是至关重要的。
当细胞生长至适宜密度时，根据实验需求，可进行冻存保藏或进一步实验处理 。细胞冻存时，需先配置含有适当比例血清和DMSO的冻存液，将细胞悬液与冻存液混合后 ，置于程序降温盒中，逐步降温至-80℃超低温冰箱，最终转移至液氮罐中长期保存 。这一过程确保了细胞的长期存活和实验的可重复性。
综上所述，细胞处理是一个精细且需要耐心的工作 ，从复苏到传代再到后续的维护 ，每一步都需严格遵循操作规程，以确保细胞的健康生长和实验的成功进行。