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HK-2 人肾皮质近曲小管上皮细胞培养基及培养冻存条件准备
点击次数 ：577 更新时间 ：2024-01-08
培养基及培养冻存条件准备：
1）准备 角质细胞无血清培养基或者 Defined K-SFM ，添加对应因子 ，1% P/S 来培养细胞 。
备注:Defined K-SFM培养液包含两个组份 ：基础培养基1瓶+生长因子1管
2）培养条件 ： 气相：空气，95%；二氧化碳，5% 。 温度 ：37℃，培养箱湿度为70%-80% 。
3）冻存液 ：培养液92.5%，7.5%DMSO，现用现配 。
4）传代比例：如果没有特别说明，收到细胞后的第一次传代一般是1:2。传代周期：4-6天，换液频率 ：每周 2-3次 。
备注 ：
1. 该细胞贴壁较慢 ，为使细胞贴壁更容易，建议可提前在培养皿/培养瓶中铺0.25%的明胶溶液，并于贴壁24~48小时后再进行后续操作。
2. 该细胞生长不能过密 ，请在生长密度80%时进行传代。
3.使用0.05%消化细胞，由于Defined K-SFM为无血清培养液无法终止消化，所以消化完成后要通过离心（建议125xg离心5到10分钟）去除或者用带10%血清的培养基来终止消化 ，再进行后续操作 。