操作步骤:
1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2400pg/ml 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
1200pg/ml 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
600pg/ml 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
300pg/ml 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
150pg/ml 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔 。在酶标包被板上标准品准确加样50μl ，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部 ，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟 。
4. 配液 ：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤 ：小心揭掉封板膜 ，弃去液体，甩干 ，每孔加满洗涤液 ，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3 。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色 ：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10. 终止 ：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。
计算
以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线 ，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数 ，即为样品的实际浓度。
无水磷酸三钠/三碱式磷酸钠/原磷酸三钠/磷酸三钠/磷酸钠/Trisodium phosphateAR ，98%，500克国产/进口
2,2-联喹啉-4,4-二羧酸钠/4,4-二羧基-2,2-联喹啉二钠/2,2-联喹啉-4,4-二甲酸二钠/BCABR，98%5克国产/进口
D(-)酒石酸钠/酒石酸钠/D-酒石酸钠/2,3-二羟基丁二酸钠/D-(+)-Tartaric acid disodium saltAR，99%500克国产/进口
L(-)酒石酸钠/酒石酸钠/L-酒石酸钠/L-(+)-Tartaric acid disodium saltAR，99%500克国产/进口
偏钒酸钠/二水偏钒酸钠/钒酸钠/Sodium metavanadate dihydrateAR，99.9%，25克国产
无水偏钒酸钠/钒酸钠/Sodium metavanadateAR，99%，25克国产/进口
四苯硼钠/四苯基硼酸钠/四苯硼酸钠/NaTBPAR ；99%，10克国产/进口
氟化钠/Sodium fluorideGR，99%，500克国产
氢氧化钠/苛性钠/烧碱/钠氧条/苛性曹达/固碱/火碱/Sodium hydroxideGR ，97%，500克国产
氟硼酸钠/四氟硼钠/四氟硼酸钠/Sodium fluoroborateCP，98% ，500克国产
六偏磷酸钠/偏磷酸六钠/格来汉氏盐/卡甘/磷酸钠玻璃/格腊哈姆盐/六偏/六聚偏磷酸钠/Sodium hexametaphoshpateCP，95%500克国产/进口
萘酚AS-MX磷酸盐/色酚AS-MX磷酸盐/磷酸萘酚AS-MX/Naphthol AS-MX phosphate高纯 ，99%500毫克国产/进口
萘酚AS-BI磷酸二钠/萘酚磷酸钠/7-溴-N-(2-甲氧基苯基)-3-(磷酸氧基)萘-2-甲酰胺二钠盐/Naphthol AS-BI phosphate disodium saltBR ，99.5%100毫克国产/进口
单硬脂酸甘油酯/硬脂酸甘油酯/单甘酯/甘油单硬酯酸酯/十八酸甘油酯/GMSCP100克国产/进口
丁二酸二甲酯/琥珀酸二甲酯/琥珀酸甲酯/Dimethyl succinateCP，98%100毫升国产/进口
乙酰乙酸甲酯/乙酰醋酸甲酯/丁酮酸甲酯/β-丁酮酸甲酯/3-丁酮酸甲酯/MAACP，98%500毫升国产/进口
对羟基苯甲酸甲酯/尼泊金甲酯/4-羟基苯甲酸甲酯/对羟基安息香酸甲酯/泊金M/尼泊金/Methyl 4-hydroxybenzoateCP，98.5%100克国产/进口